论文部分内容阅读
目的为探讨胰高血糖素样肽-1 (glucagon-like peptide-1,GLP-1)受体激动剂对骨保护作用的机制,应用GLP-1受体激动剂(艾塞那肽)干预高脂导致的小鼠成骨细胞凋亡实验,观察艾塞那肽在成骨细胞凋亡过程中的保护作用。方法体外应用含500μmol/L棕榈酸(palmitic acid,PA)完全培养基处理小鼠成骨细胞MC3T3-E1 14模拟体内高脂环境,分组如下:正常对照组(0μmol/L PA)、高脂组(500μmol/L PA)、高脂+艾塞那肽(1、10、100、1 000 nmol/L)浓度梯度组分别孵育成骨细胞24 h。根据实验结果选择艾塞那肽最佳浓度100 nmol/L进行后续实验,分正常对照组、艾塞那肽组、高脂+艾塞那肽组、高脂组,观察艾塞那肽对成骨细胞增殖和凋亡的影响。Cell Counting Kit-8试剂盒检测细胞增殖活性; Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率; RT-qPCR技术检测各组细胞内质网应激相关基因GRP78、CHOP、Caspase-12mRNA的表达。结果与正常对照组相比,高脂组细胞活性明显下降(OD值:2. 612±0. 106 vs. 2. 394±0. 088,P<0. 01);与高脂组相比,高脂+艾塞那肽1 000 nmol/L组、高脂+艾塞那肽100 nmol/L组、高脂+艾塞那肽10 nmol/L组细胞增殖活性明显升高(OD值:2. 394±0. 088、2. 547±0. 068、2. 579±0. 060、2. 496±0. 114,P<0. 05),高脂+艾塞那肽1 nmol/L组对细胞的增殖活力无明显影响(P> 0. 05)。选择艾塞那肽100 nmol/L为最佳浓度重复干预后发现,与高脂组相比,高脂+艾塞那肽100 nmol/L组的细胞增殖活力明显升高(OD值:2. 161±0. 203,2. 399±0. 193,P<0. 01);细胞凋亡率明显下降(19. 633%±3. 169%,5. 400%±2. 304%,P<0. 01); GRP78、CHOP mRNA的表达量明显下降(P <0. 01),Caspase-12 mRNA的表达量回升(P<0. 05)。结论 GLP-1受体激动剂艾塞那肽可能通过内质网应激途径,改善PA造成的小鼠成骨细胞增殖活性减低以及凋亡的发生。