向日葵Pst Ⅰ和Mse Ⅰ内切酶组合AFLP标记体系的建立及引物筛选

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为建立并优化适合向日葵的Pst Ⅰ和Mse Ⅰ组合的AFLP技术体系,为下一步构建遗传连锁图谱及开展分子标记辅助育种奠定基础,对向日葵基因组DNA提取方法、酶切连接体系和选择性扩增程序的影响因素进行优化,并对适合向日葵AFLP分析的引物组合进行筛选。结果表明,模板DNA的提取采用改进CTAB法,酶切连接采用一步法反应14 h,在选择性扩增体系20μL中,Mg2+和d NTP浓度分别为2 mmol/L和0.3 mmol/L,选扩引物的浓度为0.6 mmol/L,预扩增产物最适稀释倍数为30倍。同时筛选出了稳
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