【摘 要】
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为建立水禽源细小病毒的快速检测方法,本研究采用纯化的小鹅瘟病毒(GPV)免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,筛选到21株能够稳定分泌抗GPV的单克隆抗
【机 构】
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福建省农业科学院畜牧兽医研究所 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心/福建省禽病防治重点实验室,福建福州,350013厦门市波生生物技术有限公司,福建厦门,360121;
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为建立水禽源细小病毒的快速检测方法,本研究采用纯化的小鹅瘟病毒(GPV)免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,筛选到21株能够稳定分泌抗GPV的单克隆抗体(MAb),将1株MAb纯化后与胶体金结合,喷涂金标垫,与另一株纯化的MAb配对,制成检测水禽源细小病毒的胶体金试纸条.特异性试验表明,鹅细小病毒、番鸭细小病毒和新型番鸭细小病毒的检测结果均为阳性,猪细小病毒、1型鸭甲肝病毒、坦布苏病毒、产蛋下降综合征病毒、H9N2亚型禽流感病毒、番鸭呼肠孤病毒和新城疫病毒等的检测结果均为阴性.该方法对鹅细小病毒、番鸭细小病毒和新型番鸭细小病毒的最低检出量分别为104.7 ELD50/mL、104.7ELD50/mL和105.7 ELD50/mL.重复性试验良好.对临床粪便样品的检测,该方法比PCR方法简单快速,但是存在漏检的情况.上述结果表明,本实验建立的方法可用于水禽源细小病毒病的初步快速筛查.
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