牛分枝杆菌MPB70蛋白单克隆抗体的制备及检测

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户：simple69

【摘要】

：

为了制备牛分枝杆菌的单克隆抗体,本试验利用制备的原核表达的牛分枝杆菌重要抗原蛋白MPB70作为免疫原皮下多点注射免疫BALB/c小鼠。利用细胞融合技术,经过5次亚克隆与筛选,

【作者】

：

周曼莉周玉成张海威乔连江杨艳玲

【机构】

：

中国农业科学院特产研究所,宁夏大学

【出处】

：

中国畜牧兽医

【发表日期】

：

2019年10期

【关键词】

：

结核分枝杆菌 MPB70蛋白单克隆抗体

【基金项目】

：

“十三五”重点研发项目“牛羊重要病原分子诊断新技术”(2016YFD00500900);宁夏回族自治区重点研发计划项目(东西部合作)“牛羊重要传染病快速诊断与检测关键技术研究”(2017BN041)

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为了制备牛分枝杆菌的单克隆抗体,本试验利用制备的原核表达的牛分枝杆菌重要抗原蛋白MPB70作为免疫原皮下多点注射免疫BALB/c小鼠。利用细胞融合技术,经过5次亚克隆与筛选,取已免疫好的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在PEG3500的作用下进行细胞融合。筛选得到了2株分泌抗牛分枝杆菌MPB70蛋白的杂交瘤细胞,分别命名为Anti-B-MPB70:8和Anti-B-MPB70:12。采用间接ELISA方法对获得的单克隆抗体进行亲和常数检测、效价分析及亚类鉴定,通过SDS-PAGE凝胶试验对单克隆抗体进行纯

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