【摘 要】
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目的:探究甲基化酶抑制剂5-氮杂胞苷(5-azacytidin,5-aza)对T淋巴细胞(Jurkat)miR-126、Th1/Th2、Th17/Treg细胞亚群及因子IFN-γ、GATA3、ROR-γ和Foxp3的调控作用.方法:采用不同浓度5-aza干预T淋巴细胞,24h、48h后检测其对细胞增殖抑制作用;实时荧光定量PCR、Western Blot检测5-aza干预后miR-126表达水平以及IFN-γ、GATA3、ROR-γ和Foxp3的mRNA及蛋白表达水平;流式细胞术检测5-aza干预后Th1
【机 构】
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新疆医科大学中医学院 新疆乌鲁木齐830000;新疆医科大学第四附属医院 新疆乌鲁木齐830000;新疆医科大学第六附属医院 新疆乌鲁木齐830000;新疆医科大学中心实验室 新疆乌鲁木齐830000
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目的:探究甲基化酶抑制剂5-氮杂胞苷(5-azacytidin,5-aza)对T淋巴细胞(Jurkat)miR-126、Th1/Th2、Th17/Treg细胞亚群及因子IFN-γ、GATA3、ROR-γ和Foxp3的调控作用.方法:采用不同浓度5-aza干预T淋巴细胞,24h、48h后检测其对细胞增殖抑制作用;实时荧光定量PCR、Western Blot检测5-aza干预后miR-126表达水平以及IFN-γ、GATA3、ROR-γ和Foxp3的mRNA及蛋白表达水平;流式细胞术检测5-aza干预后Th1/Th2、Th17/Treg细胞亚群分化比例.结果:甲基化酶抑制剂干预T淋巴细胞后,细胞抑制率随5-aza浓度增大及作用时间延长呈递增趋势(P＜0.01);细胞抑制率在24h、48 h,低、中、高浓度下分别为(14.73±0.93)％、(32.67±8.40)％、(60.87±5.78)％以及(18.98±0.73)％、(39.80±8.42)％、(64.11±6.04)％;抑制率在24h与48 h之间无差异(P＞0.05).甲基化酶抑制剂干预后miR-126表达降低(P＜0.01);IFN-γ蛋白表达降低(P＜0.05)、Th1细胞亚群数目降低(P＜0.01);GATA3 mRNA和蛋白表达升高(P＜0.05)、Th2细胞亚群数目增加(P＜0.01);ROR-γ蛋白表达降低(P＞0.05)、Th17细胞亚群数目降低(P＜0.05);Foxp3 mRNA和蛋白表达升高(P＞0.05)、Treg细胞亚群数目增加(P＜0.05).结论:甲基化酶抑制剂可以下调Jurkat细胞miR-126基因表达;下调Th1、Th17细胞亚群分化,上调Th2、Treg细胞亚群分化;调控细胞因子IFN-γ、 GATA3、ROR-γ和Foxp3的表达.
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