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摘要[目的]通过正交试验探讨提取维药阿育魏实总多糖的最佳提取工艺，为资源的合理开发利用提供科学依据。[方法]以水为溶剂回流提取，采用苯酚-浓硫酸法显色，采用紫外分光光度法（UV）测定阿育魏实中总多糖的含量，并进行方法学验证。[结果]维药阿育魏实总多糖的最佳提取工艺为提取温度90 ℃、提取时间3 h、料液比1∶50、提取次数1次；标准品溶液和供试品溶液均在488 nm处有最大吸收，总多糖溶液浓度在0.002 5～0.012 5 mg/ml线性关系良好（r=0.999 3）；精密度试验、稳定性试验、重复性试验和加样回收率试验的RSD值分别为0.6%、0.5%、0.069%和0.9%，同时得到阿育魏实多糖平均提取率可达3.41 mg/g。[结论]该方法具有操作简单、重复性好、灵敏度高，适用于阿育魏实中总多糖含量测定。
关键词 阿育魏实；总多糖；提取工艺
中图分类号S567文献标识码A文章编号0517-6611（2014）24-08162-02
Study on Extraction Process of Total Polysaccharide from Trachyspermum ammi （L.）Sparuge
ZHANG Hui， Hailiqian TAOERDAHONG et al（Pharmacy College of Xinjiang Medical University， Urumqi， Xinjiang 830011）
Abstract[Objective] To discuss the optimal extraction technique of total polysaccharide from Trachyspermum ammi by orthogonal test， provide scientific reference for rational development and utilization of resources. [Method] With water as solvent for reflux extraction， using the phenolsulfuric acid method and ultraviolet spectrophotometry， the content of total polysaccharide in Trachyspermum ammi was determined. [Result] The optimal extraction technique conditions are： temperature 90 ℃， time 3 h， solidliquid ratio 1∶50， 1 times； the maximum absorption of standard solution and sample solution all are at 488 nm， good linear relationship（r=0.999 3） of total polysaccharide is in 0.002 5-0.012 5 mg/ml； RSD value of precision test， stability test， repeatability test and sample recovery rate test are 0.6%， 0.5%， 0.069% and 0.9% respectively， the average extraction rate of polysaccharide in Trachyspermum ammi is 3.41 mg/g. [Conclusion] The method has features of simple operation， good repeatability and high sensitivity， which can be used for content determination of polysaccharide in Trachyspermum ammi.
Key wordsTrachyspermum ammi（L.） Sprague； Total polysaccharide； Extraction process
阿育魏實是一种传统的维吾尔药，被中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔药分册（1999年） 收载，为伞形科糙果芹属植物阿育魏（Trachyspermum ammi（L.） Sprague）的干燥成熟果实，具有燥寒湿、散寒气、消积食、排结石、疗肤疾，用于寒性瘫痪、筋脉软弱、胃寒作痛、呃逆频频、呕恶食少、小便不利、体内结石、皮肤瘙痒、白癜风、湿疹[1]。
多糖是天然高分子化合物，是一切有生命的有机体必不可少的成分。多糖包括活性多糖和膳食纤维两大类，活性多糖专指具有某种特殊生物活性的多糖化合物，如真菌多糖、植物多糖和壳聚糖等。这些多糖具有复杂的、多方面的生理活性和功能，具有降血糖、降血脂、抗辐射、抗衰老、抗肿瘤、杀菌抗炎、提高免疫力等功效，因而越来越引起人们的关注[2-4]。笔者对维吾尔药阿育魏实中的多糖[5]进行提取工艺及含量的测定[6-8]，运用正交试验系统考察了阿育魏实中多糖的最佳提取条件。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 研究对象。阿育魏实种子，购自自治区维吾尔医院，经新疆医科大学药学院天然药物化学教研室帕丽达·阿布利孜教授鉴定为伞形科糙果芹属[Trachyspermum ammi （L.）Sparμge]的成熟果实。
1.1.2 主要仪器。UV9100d紫外分光光度计（北京莱伯泰科仪器有限公司），超声波清洗机（上海科导超声仪器有限公司），万能粉碎机（北京中兴伟业仪器有限公司），XS205型电子分析天平（托利多-梅特勒（上海）有限公司），RE52型旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司）。 1.1.3 主要试剂。葡萄糖标准品（批号0080-9705，中国药品生物制品鉴定所提供），浓硫酸，苯酚均为分析纯，市售；水为超纯水，实验室自制。
1.2 方法
3 结论
（1）初步研究表明阿育魏实中水溶性化学成分含多糖[5]，此试验以苯酚硫酸法测定阿育魏实中多糖量为指标，首次采用正交设计法确定了新疆地产阿育魏实中多糖的最佳提取工艺，目前国内外对于阿育魏实药材的研究资料较少，该方法可在阿育魏实原药材的成分分析及质量控制方面提供有力的参考。
（2）正交试验中，以提取次数、提取时间、提取温度、料液比4个因素进行了考查，结果表明，影响提取效果的因素依次是提取次数>提取温度>提取时间>料液比，所得提取的最佳工艺为提取温度90 ℃、提取时间3 h、料液比1∶50、提取
次数为1次；当提取温度低于90 ℃时，随着温度提高多糖提取率增加，当超过90 ℃时反而降低，在提取温度为90 ℃时阿育魏实多糖提取率最高。
（3）标准品溶液和供试品溶液均在488 nm处有最大吸收，总多糖溶液浓度在0.002 5～0.012 5 mg/ml线性关系良好（r=0.999 3）；精密度试验、稳定性试验、重复性试验和加样回收率试验的RSD值分别为0.6%、0.5%、0.069%和0.9%，同时得到阿育魏实多糖平均提取率可达3.41 mg/g。
参考文献
[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准：维吾尔药分册[S].乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社，1999：45-55.
[2] 翟延君，伍伟超，王添敏.正交试验优选柘木多糖提取工藝研究[J].中成药，2010，16（4）：353-354.
[3] 王丹，吕永磊，徐丽媛.人参多糖含量测定方法研究[J].中华中医药杂志，2011，26（4）：774-776.
[4] 陈芳，杜娟， 张秉华.天麻多糖的理化性质和药理活性研究[J].现代中医药，2009，29（6）：71-73.
[5] 张慧，胡君萍，牙克浦江·莫民. 维药阿育魏实化学成分的预试验研究[J].新疆医科大学学报，2012，35（3）：306-309.
[6] 候宝林，王茜，海力茜陶尔大洪.维药恰麻古儿多糖提取工艺研究及含量测定[J].时珍国医国药，2009，20（11）：2759-2761.
[7] 拜年，郭卉，海力茜陶尔大洪.苯酚-硫酸法测定恰麻古儿中多糖的含量[J].新疆医科大学学报，2010，33（11）：1310-1311.
[8] 王菁，白晓光，海力茜陶尔大洪. 新疆芜菁中硫代葡萄糖苷提取工艺条件的优化[J].西北药学杂志，2013，28（3）：237-239.
关键词 阿育魏实；总多糖；提取工艺
中图分类号S567文献标识码A文章编号0517-6611（2014）24-08162-02
Study on Extraction Process of Total Polysaccharide from Trachyspermum ammi （L.）Sparuge
ZHANG Hui， Hailiqian TAOERDAHONG et al（Pharmacy College of Xinjiang Medical University， Urumqi， Xinjiang 830011）
Abstract[Objective] To discuss the optimal extraction technique of total polysaccharide from Trachyspermum ammi by orthogonal test， provide scientific reference for rational development and utilization of resources. [Method] With water as solvent for reflux extraction， using the phenolsulfuric acid method and ultraviolet spectrophotometry， the content of total polysaccharide in Trachyspermum ammi was determined. [Result] The optimal extraction technique conditions are： temperature 90 ℃， time 3 h， solidliquid ratio 1∶50， 1 times； the maximum absorption of standard solution and sample solution all are at 488 nm， good linear relationship（r=0.999 3） of total polysaccharide is in 0.002 5-0.012 5 mg/ml； RSD value of precision test， stability test， repeatability test and sample recovery rate test are 0.6%， 0.5%， 0.069% and 0.9% respectively， the average extraction rate of polysaccharide in Trachyspermum ammi is 3.41 mg/g. [Conclusion] The method has features of simple operation， good repeatability and high sensitivity， which can be used for content determination of polysaccharide in Trachyspermum ammi.
Key wordsTrachyspermum ammi（L.） Sprague； Total polysaccharide； Extraction process
阿育魏實是一种传统的维吾尔药，被中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔药分册（1999年） 收载，为伞形科糙果芹属植物阿育魏（Trachyspermum ammi（L.） Sprague）的干燥成熟果实，具有燥寒湿、散寒气、消积食、排结石、疗肤疾，用于寒性瘫痪、筋脉软弱、胃寒作痛、呃逆频频、呕恶食少、小便不利、体内结石、皮肤瘙痒、白癜风、湿疹[1]。
多糖是天然高分子化合物，是一切有生命的有机体必不可少的成分。多糖包括活性多糖和膳食纤维两大类，活性多糖专指具有某种特殊生物活性的多糖化合物，如真菌多糖、植物多糖和壳聚糖等。这些多糖具有复杂的、多方面的生理活性和功能，具有降血糖、降血脂、抗辐射、抗衰老、抗肿瘤、杀菌抗炎、提高免疫力等功效，因而越来越引起人们的关注[2-4]。笔者对维吾尔药阿育魏实中的多糖[5]进行提取工艺及含量的测定[6-8]，运用正交试验系统考察了阿育魏实中多糖的最佳提取条件。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 研究对象。阿育魏实种子，购自自治区维吾尔医院，经新疆医科大学药学院天然药物化学教研室帕丽达·阿布利孜教授鉴定为伞形科糙果芹属[Trachyspermum ammi （L.）Sparμge]的成熟果实。
1.1.2 主要仪器。UV9100d紫外分光光度计（北京莱伯泰科仪器有限公司），超声波清洗机（上海科导超声仪器有限公司），万能粉碎机（北京中兴伟业仪器有限公司），XS205型电子分析天平（托利多-梅特勒（上海）有限公司），RE52型旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司）。 1.1.3 主要试剂。葡萄糖标准品（批号0080-9705，中国药品生物制品鉴定所提供），浓硫酸，苯酚均为分析纯，市售；水为超纯水，实验室自制。
1.2 方法
3 结论
（1）初步研究表明阿育魏实中水溶性化学成分含多糖[5]，此试验以苯酚硫酸法测定阿育魏实中多糖量为指标，首次采用正交设计法确定了新疆地产阿育魏实中多糖的最佳提取工艺，目前国内外对于阿育魏实药材的研究资料较少，该方法可在阿育魏实原药材的成分分析及质量控制方面提供有力的参考。
（2）正交试验中，以提取次数、提取时间、提取温度、料液比4个因素进行了考查，结果表明，影响提取效果的因素依次是提取次数>提取温度>提取时间>料液比，所得提取的最佳工艺为提取温度90 ℃、提取时间3 h、料液比1∶50、提取
次数为1次；当提取温度低于90 ℃时，随着温度提高多糖提取率增加，当超过90 ℃时反而降低，在提取温度为90 ℃时阿育魏实多糖提取率最高。
（3）标准品溶液和供试品溶液均在488 nm处有最大吸收，总多糖溶液浓度在0.002 5～0.012 5 mg/ml线性关系良好（r=0.999 3）；精密度试验、稳定性试验、重复性试验和加样回收率试验的RSD值分别为0.6%、0.5%、0.069%和0.9%，同时得到阿育魏实多糖平均提取率可达3.41 mg/g。
参考文献
[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准：维吾尔药分册[S].乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社，1999：45-55.
[2] 翟延君，伍伟超，王添敏.正交试验优选柘木多糖提取工藝研究[J].中成药，2010，16（4）：353-354.
[3] 王丹，吕永磊，徐丽媛.人参多糖含量测定方法研究[J].中华中医药杂志，2011，26（4）：774-776.
[4] 陈芳，杜娟， 张秉华.天麻多糖的理化性质和药理活性研究[J].现代中医药，2009，29（6）：71-73.
[5] 张慧，胡君萍，牙克浦江·莫民. 维药阿育魏实化学成分的预试验研究[J].新疆医科大学学报，2012，35（3）：306-309.
[6] 候宝林，王茜，海力茜陶尔大洪.维药恰麻古儿多糖提取工艺研究及含量测定[J].时珍国医国药，2009，20（11）：2759-2761.
[7] 拜年，郭卉，海力茜陶尔大洪.苯酚-硫酸法测定恰麻古儿中多糖的含量[J].新疆医科大学学报，2010，33（11）：1310-1311.
[8] 王菁，白晓光，海力茜陶尔大洪. 新疆芜菁中硫代葡萄糖苷提取工艺条件的优化[J].西北药学杂志，2013，28（3）：237-239.