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摘 要 以菠萝叶纤维为研究对象，选用5种不同溶剂提取纤维中的活性成分进行定性分析，以大肠杆菌为指示菌，评价其抑菌效果。结果表明：通过定性分析发现石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮以及水5段提取物中分别含有酚类、黄酮类、生物碱及香豆素等抗菌成分。
关键词 菠萝叶纤维 ；定性分析 ；大肠杆菌 ；抗菌成分
中图分类号 S41
菠萝（Ananas comosus），又名凤梨，为多年生单子叶草本植物，是世界典型的热带水果之一[1]。在中国广东、广西、海南、云南、福建和台湾等地区均广泛种植，年均种植面积达70 000 hm2[2]。每666.7 m2废弃叶片约5-10 t，全国废弃叶片总量近1×107 t/a，造成资源大量浪费及生态环境污染[3]。菠萝叶纤含量仅约1.5 %（干基），所提取的纤维属叶脉纤维，具有麻的风格，优点独特。《中华本草》中记载菠萝叶具有消食、合胃和止泻的功能，主治夏日暑泻、消化不良、胃脘胀痛等[4]。研究发现，该纤维具有天然抗菌、驱螨、祛除异味等3大特性[5-9]，比目前已知的麻类纤维具有更强的抗菌性，这也是对菠萝叶纤维中所含的有效化学成分定性和定量研究的意义所在。本实验着重对菠萝叶纤维中抑菌活性物质进行定性分析，为后续抑菌活性物质的分离纯化提供理论依据和基础数据。
1 材料与方法
1.1 材料
菠萝叶纤维选用卡因菠萝叶，产自湛江市徐闻县菠萝种植基地，通过自主研发的半自动刮麻机对菠萝叶进行纤维提取，将得到的纤维进行干燥处理并保存；石油醚（A.R ，60-90 ℃）、氯仿（C.P）、乙酸乙酯（A.R）、丙酮（C.P）、蒸馏水、3，5-二硝基苯甲酸（C.P）、氢氧化钾（A.R）、浓盐酸（A.R）、氢氧化钠（A.R）、三氯化铁（A.R）、溴酚蓝（A.R）、茚三酮（A.R）、碘化铋钾（C.P）、甲醇（A.R）、镁粉（C.P）、盐酸羟胺（A.R）、硫酸铜（A.R）、95 %乙醇（食用级）、苦味酸（A.R）、冰醋酸（A.R）、大肠杆菌ATCC25922。
SHB-ⅢS循环水式真空泵和DLSB-5/20型低温冷却循环泵、HHSⅡ-4型电热恒温水浴锅、WS210S 型电子天平、RE-52A型旋转蒸发仪、CR22GⅡ高速冷冻离心机。
1.2 方法
1.2.1 不同极性粗体物的制备
干纤维称取10 g，粉碎，置入500 mL圆底烧瓶中，加入石油醚400 mL，水浴回流加热2 h，冷却，过滤，滤液浓缩成浸膏，得干纤维石油醚提取部分（A），滤渣挥干溶剂；取上述滤渣置于500 mL圆底烧瓶中，加氯仿400 mL，水浴回流加热2 h，冷却，过滤，滤液浓缩成浸膏，得干纤维氯仿提取部分（B），滤渣挥干溶剂；取滤渣置于500 mL圆底烧瓶中，加乙酸乙酯400 mL，水浴回流加热2 h，冷却，过滤，滤液浓缩成浸膏，得干纤维乙酸乙酯提取部分（C），滤渣挥干溶剂；取滤渣置入500 mL圆底烧瓶中，加入丙酮400 mL，水浴回流加热2 h，冷却，过滤，滤液浓缩成浸膏，得干纤维丙酮提取部分（D）；取滤渣置入500 mL圆底烧瓶中，加水400 mL，水浴回流加热2 h，冷却，过滤，滤液浓缩成浸膏，得干纤维水提取部分（E）。
1.2.2 不同极性段化学成分抑菌试验及定性分析
采用琼脂扩散法测抑菌活性，采用特殊显色剂对5部分提取物进行定性分析。
2 结果与分析
2.1 抑菌试验结果
以大肠杆菌做指示菌，采用琼脂扩散法测抑菌活性（表1）。从表1中可以看出，纤维在乙酸乙酯、丙酮和水中浸提所得到的提取物都有抑菌活性，且丙酮萃取得到的物质抑菌效果最好，对大肠杆菌的抑菌圈直径最大值为14.76 mm。因此，选择丙酮为萃取剂。
2.2 化学成分定性分析
将A、B、C、D、E 5个极性段浸膏采用特殊显色剂及实验方法对5部分提取物进行定性分析（表2、3）。由表2、3中可以看出，菠萝叶纤维中含有黄酮类、酚类、生物碱和香豆素等，且D部分提取物对黄酮类和酚类的显色现象非常明显。
3 结论
本实验观察了5种不同溶剂对菠萝叶纤维的萃取，所得到萃取物通过定性分析发现，纤维中含有酚类、黄酮类、生物碱和香豆素等物质。根据文献报道，大麻、罗布麻等含有酚类、黄酮类等化合物[10-13]，且这两类化合物具有抑菌效果，由此推测菠萝叶纤维中起到抑菌效果的物质也可能是这2类化合物[14-16]。对5种不同溶剂所萃取到的浓缩物进行抑菌试验，结果表明：使用丙酮溶剂萃取所得到的浓缩物抑菌圈直径为14.76 mm，抑菌效果最好。
参考文献
[1] 王庆煌. 热带作物产品加工原理与技术[M]. 北京：科学出版社，2012：294-331.
[2] 刘传和，刘 岩. 我国菠萝生产现状及研究概况[J]. 广东农业科学，2010（10）：65-68.
[3] 邓干然，张 劲，欧忠庆，等. 菠萝叶刮麻机的噪声分析及其控制[J]. 农业工程学报，2009，25（8）：99-104.
[4] 国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草（第8卷）[M].上海：科学技术出版社，1999：7 357.
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[8] Xie W D，Xing D M，Sun H，et al. The effect of Ananas comosus L. leaves on diabetic-dyslipidemic rats induced by alloxan and a high-fat/high-cholesterol diet[J]. Am J Chin Med，2005，33（1）：95.
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[11] Appendino G，Gibbons S，Giana S，et al. Antibacterial cannabinoids from Cannabis sativa：a structure-activity study[J]. Journal of natural products，2008，71（8）：1 427-1 430.
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[16] 冯德才，刘小林，杨 其，等. 抗菌剂与抗菌纤维的研究进展[J]. 合成纤维工业，2005，28（4）：40-42.
关键词 菠萝叶纤维 ；定性分析 ；大肠杆菌 ；抗菌成分
中图分类号 S41
菠萝（Ananas comosus），又名凤梨，为多年生单子叶草本植物，是世界典型的热带水果之一[1]。在中国广东、广西、海南、云南、福建和台湾等地区均广泛种植，年均种植面积达70 000 hm2[2]。每666.7 m2废弃叶片约5-10 t，全国废弃叶片总量近1×107 t/a，造成资源大量浪费及生态环境污染[3]。菠萝叶纤含量仅约1.5 %（干基），所提取的纤维属叶脉纤维，具有麻的风格，优点独特。《中华本草》中记载菠萝叶具有消食、合胃和止泻的功能，主治夏日暑泻、消化不良、胃脘胀痛等[4]。研究发现，该纤维具有天然抗菌、驱螨、祛除异味等3大特性[5-9]，比目前已知的麻类纤维具有更强的抗菌性，这也是对菠萝叶纤维中所含的有效化学成分定性和定量研究的意义所在。本实验着重对菠萝叶纤维中抑菌活性物质进行定性分析，为后续抑菌活性物质的分离纯化提供理论依据和基础数据。
1 材料与方法
1.1 材料
菠萝叶纤维选用卡因菠萝叶，产自湛江市徐闻县菠萝种植基地，通过自主研发的半自动刮麻机对菠萝叶进行纤维提取，将得到的纤维进行干燥处理并保存；石油醚（A.R ，60-90 ℃）、氯仿（C.P）、乙酸乙酯（A.R）、丙酮（C.P）、蒸馏水、3，5-二硝基苯甲酸（C.P）、氢氧化钾（A.R）、浓盐酸（A.R）、氢氧化钠（A.R）、三氯化铁（A.R）、溴酚蓝（A.R）、茚三酮（A.R）、碘化铋钾（C.P）、甲醇（A.R）、镁粉（C.P）、盐酸羟胺（A.R）、硫酸铜（A.R）、95 %乙醇（食用级）、苦味酸（A.R）、冰醋酸（A.R）、大肠杆菌ATCC25922。
SHB-ⅢS循环水式真空泵和DLSB-5/20型低温冷却循环泵、HHSⅡ-4型电热恒温水浴锅、WS210S 型电子天平、RE-52A型旋转蒸发仪、CR22GⅡ高速冷冻离心机。
1.2 方法
1.2.1 不同极性粗体物的制备
干纤维称取10 g，粉碎，置入500 mL圆底烧瓶中，加入石油醚400 mL，水浴回流加热2 h，冷却，过滤，滤液浓缩成浸膏，得干纤维石油醚提取部分（A），滤渣挥干溶剂；取上述滤渣置于500 mL圆底烧瓶中，加氯仿400 mL，水浴回流加热2 h，冷却，过滤，滤液浓缩成浸膏，得干纤维氯仿提取部分（B），滤渣挥干溶剂；取滤渣置于500 mL圆底烧瓶中，加乙酸乙酯400 mL，水浴回流加热2 h，冷却，过滤，滤液浓缩成浸膏，得干纤维乙酸乙酯提取部分（C），滤渣挥干溶剂；取滤渣置入500 mL圆底烧瓶中，加入丙酮400 mL，水浴回流加热2 h，冷却，过滤，滤液浓缩成浸膏，得干纤维丙酮提取部分（D）；取滤渣置入500 mL圆底烧瓶中，加水400 mL，水浴回流加热2 h，冷却，过滤，滤液浓缩成浸膏，得干纤维水提取部分（E）。
1.2.2 不同极性段化学成分抑菌试验及定性分析
采用琼脂扩散法测抑菌活性，采用特殊显色剂对5部分提取物进行定性分析。
2 结果与分析
2.1 抑菌试验结果
以大肠杆菌做指示菌，采用琼脂扩散法测抑菌活性（表1）。从表1中可以看出，纤维在乙酸乙酯、丙酮和水中浸提所得到的提取物都有抑菌活性，且丙酮萃取得到的物质抑菌效果最好，对大肠杆菌的抑菌圈直径最大值为14.76 mm。因此，选择丙酮为萃取剂。
2.2 化学成分定性分析
将A、B、C、D、E 5个极性段浸膏采用特殊显色剂及实验方法对5部分提取物进行定性分析（表2、3）。由表2、3中可以看出，菠萝叶纤维中含有黄酮类、酚类、生物碱和香豆素等，且D部分提取物对黄酮类和酚类的显色现象非常明显。
3 结论
本实验观察了5种不同溶剂对菠萝叶纤维的萃取，所得到萃取物通过定性分析发现，纤维中含有酚类、黄酮类、生物碱和香豆素等物质。根据文献报道，大麻、罗布麻等含有酚类、黄酮类等化合物[10-13]，且这两类化合物具有抑菌效果，由此推测菠萝叶纤维中起到抑菌效果的物质也可能是这2类化合物[14-16]。对5种不同溶剂所萃取到的浓缩物进行抑菌试验，结果表明：使用丙酮溶剂萃取所得到的浓缩物抑菌圈直径为14.76 mm，抑菌效果最好。
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[8] Xie W D，Xing D M，Sun H，et al. The effect of Ananas comosus L. leaves on diabetic-dyslipidemic rats induced by alloxan and a high-fat/high-cholesterol diet[J]. Am J Chin Med，2005，33（1）：95.
[9] Takata RH. Isolation of glyceryl esters of caffeic andp-coumaric acids from Pineapple stems[J]. Lloydia，1976，39（6）：409.
[10] Takata R H，Scheuer P J. Ananasic acid，a newtrihydroxyterpenecar-boxylic acid from Pineapple stems[J]. Tetrahedron，1976，32：1 077.
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