【摘 要】
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目的 探索PYCR1(pyrroline-5-carpoxylate reductase-1,吡咯啉-5-羧酸还原酶-1)在结肠癌中的表达和对结肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移的影响。方法 RT-qPCR和免疫组化检测PYCR1
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院消化内科;
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目的 探索PYCR1(pyrroline-5-carpoxylate reductase-1,吡咯啉-5-羧酸还原酶-1)在结肠癌中的表达和对结肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移的影响。方法 RT-qPCR和免疫组化检测PYCR1在结肠癌及癌旁组织的表达情况。RT-qPCR和Western blot筛选结肠癌细胞株和检验质粒转染后干扰效果。CCK8、克隆形成、Transwell实验检测增殖、侵袭和迁移能力。Western blot检测上皮间质转化相关蛋白表达情况。结果 PYCR1在结肠癌组织中呈高表达(P<0.01),选取HCT116和SW480作为后续实验对象(P<0.01)。构建PYCR1干扰质粒,RT-qPCR和Western blot结果显示shPYCR1组m RNA(P<0.05)和蛋白表达(P<0.01)明显低于shPYCR1-vector组。与shPYCR1-vector组相比,shPYCR1组细胞的增殖、侵袭和迁移能力均减弱(P<0.05)。Western blot结果显示相对于shPYCR1-vector组,shPYCR1组的E-cadherin表达上升(P<0.05),N-cadherin、Vimentin、β-catenin和c-Myc表达下降(P<0.05)。结论 PYCR1在结肠癌组织中呈高表达,干扰PYCR1可明显抑制结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。
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