【摘 要】
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目的建立一种柱前衍生反相高效液相色谱-荧光检测法同时测定血浆同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)、半胱氨酸(cysteine, Cys)、半胱氨酰甘氨酸(cysteinylglycine, CysGly)、
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目的建立一种柱前衍生反相高效液相色谱-荧光检测法同时测定血浆同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)、半胱氨酸(cysteine, Cys)、半胱氨酰甘氨酸(cysteinylglycine, CysGly)、谷胱甘肽(glutathione, GSH)的方法.方法以 tris-(2-carboxylethyl)-phosphine (TCEP) 为还原剂,7-fluorbenzo-2-oxa-1, 3-diazole-4-sulfonate (SBD-F) 为衍生剂,N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcystine,NAC)为内标,C8柱分离.流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液(25 mmol/L,pH 3.0),梯度洗脱,激发波长(λex)380 nm,发射波长(λem)510 nm,内标标准曲线法定量.结果 Hcy、Cys、CysGly、GSH的线性范围分别为1.0～160.0 μmol/L,30.0～1 040.0 μmol/L,2.0～300.0 μmol/L,1.0～130.0 μmol/L,具有良好的相关性,r为0.999 4～0.999 9.最低检测限为0.1～2.0 μmol/L.日内精密度不超过3.0%,日间精密度除GSH为13.21%外均小于6.0%.平均回收率为87.24%～114.99%.结论本方法准确、灵敏、快速、特异,适合于实验室研究和临床常规检测.
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