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【摘 要】 目的 探究HPV基因分型检测的临床应用价值。方法 收集2013年8月～2014年9月四川省人民医院妇产科液基细胞学标本120例，其中43例正常细胞学，62例ASC/AGC，10例LSIL，5例HSIL，病理学分类为：84例慢性宫颈炎，18例CIN1，10例CIN2，4例CIN3，4例SCC（宫颈鳞状细胞癌）。应用HPV基因分型检测对HPV病毒进行筛查和判断分型，并进行分析。结果 正常细胞学、ASC/AGC、LSIL、HSIL的阳性率分别为20.9%、75.8%、80.0%、100.0%;病理学分类，慢性宫颈炎、CIN1、CIN2、CIN3、SCC的阳性率分别为42.9%、83.3%、100.0%、100.0%、100.0%（4/4）。HPV病毒的感染率为57.5%，总计检测出16种HPV病毒亚型，排在前五的依次为：HPV16亚型、HPV58亚型、HPV18亚型、HPV52亚型、HPV31亚型。合并HPV16亚型感染的多重感染患者人数最多，有11例。HR-HPV的感染率随着宫颈病变的严重程度的增加而增加，CIN2、CIN3、SCC的患者HPV阳性率达到100%。结论 HPV基因分型检测可有效分析HPV病毒感染，具有临床应用价值。
【关键词】 HPV基因分型检测 宫颈癌 临床应用
【中图分类号】 R737.33 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-5160（2015）01-0008-01
近几年来，越来越多的学者认为，宫颈癌及其癌变前的病变主要是由HR-HPV（高危型人乳头瘤病毒）的持续感染所引起的[1]，在2005年召开的中国子宫颈癌会议上，明确提出：HPV感染是导致宫颈癌病变的必要、关键因素。HPV分型很多，其致病性与HPV的分型紧密相关，故HPV基因的分型检测对宫颈癌的筛查、预防、治疗及预后都具有非常重要的价值[2]。
1 资料与方法
1.1 一般资料
收集2012年1月～2014年1月我院妇产科液基细胞学标本120例，其中43例正常细胞学，62例ASC/AGC，10例LSIL（低度鳞状上皮内病变），5例HSIL（高度鳞状上皮内病变）;患者年龄分布为25～75岁，平均年龄为（39.5±10.2）岁;以活检标本的病理学诊断为标准，病理学分类为：84例慢性宫颈炎，18例CIN1（宫颈上皮内瘤变低度），10例CIN2（宫颈上皮内瘤变高度），4例CIN3（宫颈上皮内瘤变高度），4例SCC（宫颈鳞状细胞癌）。
1.2 方法
采用美国应用生物系统公司（ABI）生产的PCR扩增仪、杂交仪、人乳头瘤病毒分型基因检测系统。应用上海伟进生物科技有限公司生产的DNA抽提试剂盒，反向点杂交探针，通用引物PCR，β-action引物PCR，生物素标记引物。根据仪器和试剂的操作说明书进行HPV基因的分型检测。
1.3 统计学方法
应用SPSS20.0软件包进行数据处理，计数资料采用x2检验，当P<0.05时差异具有统计学意义。若患者多重感染则计算基因型阳性率时采用重复计算。
2 结果
2.1 HPV基因分型检测结果
本研究中，正常细胞学的阳性率为20.9%（9/43），ASC/AGC的阳性率为75.8%（47/62），LSIL的阳性率为80.0%（8/10），HSIL的阳性率为100.0%（5/5）;病理学分类，慢性宫颈炎的阳性率为42.9%（36/84），CIN1的阳性率为83.3%（15/18），CIN2的阳性率为100.0%（10/10）， CIN3的阳性率为100.0%（4/4），SCC的阳性率为100.0%（4/4）。
2.2 HPV感染的基因亚型分布及其和宫颈病变严重程度的关系
本研究120例液基细胞学标本中，HPV病毒的感染率为57.5%（69/120）。HPV单一型感染率为37.5% （45/120），HPV二重感染率为10.0%（12/120），HPV三重感染率为5.0%（6/120），HPV四重感染率为1.7%（2/120），HPV五重感染率为3.3%（4/120）。总计检测出16种HPV病毒亚型，排在前五的依次为：HPV16亚型（44.9%），HPV58亚型（20.3%），HPV18亚型（17.4%），HPV52亚型（14.5%），HPV31亚型（10.1%）。HPV感染的基因亚型和宫颈病变严重程度的关系见表1。
表1 HPV亚型和宫颈病变严重程度的关系
2.3 CIN病变严重程度不同的组织中HR-HPV的多重感染情况
本文中，正常细胞学2例，ASC16例，LSIL4例，HSIL2例，总计24例检测结果为多重HPV感染，这24例患者的病理学结果为：慢性宫颈炎10例，10例CIN1，2例CIN2，2例SCC。其中合并HPV16亚型感染的多重感染患者有11例，合并HPV58亚型感染的多重感染患者有8例，合并HPV18亚型感染的多重感染患者有4例，合并HPV31亚型感染的多重感染患者有4例。
2.4 HPV感染患者人口学特征
以中位年龄作为分界点，考察HPV感染患者的人口学特征。发现农村和年龄高患者发生CIN2、CIN3和SCC概率较高。
*P<0.05
3 讨论
本研究进一步证实：HPV病毒感染，尤其HPV高危病毒的感染是导致宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈癌的第一因素。本文中，正常细胞学、ASC/AGC、LSIL、HSIL的阳性率分别为20.9%、75.8%、80.0%、100.0%;病理学分类，慢性宫颈炎、CIN1、CIN2、CIN3、SCC的阳性率分别为42.9%、83.3%、100.0%、100.0%、100.0%（4/4）。HR-HPV的感染率随着宫颈病变的严重程度的增加而增加，CIN2、CIN3、SCC的患者HPV阳性率达到100%。上述数据表面，HPV病毒感染和宫颈病变的严重程度呈正相关性。
HPV感染是导致宫颈癌病变的必要因素，是筛查宫颈癌的重要指标。HPV分型很多，因为其致病性与HPV的分型紧密相关，故HPV基因的分型检测对宫颈癌的筛查、预防、治疗及预后都具有非常重要的价值，可帮助评估和管理类宫颈异常细胞学，作为病程进展的判断指标，还可为HPV病毒疫苗的研制提供理论依据。
本研究中，69例HPV感染中有24例为多重感染。其中合并HPV16亚型感染的多重感染患者最多，有11例。有研究表明：HPV多重感染和宫颈病变的严重程度呈现出相关性，且多重感染的患者病情进展为宫颈癌的几率高于单一型感染者[3]。本研究中，混合性HPV感染的患者CIN发病率显著高于单一型感染（P<0.05）。（感染者的年龄和地域性差异没有体现）表明：HPV混合感染可能对宫颈上皮内瘤变的病发和进展存在辅助及累加的作用。
总之，HPV基因分型检测可有效分析HPV病毒感染，对宫颈癌的筛查、预防、治疗及预后都具有非常重要的意义，具有临床应用价值。
参考文献
[1] 马晓星， 李亚里， 胡凌云， 等. HR-HPV 载量与宫颈病变的相关性分析[J]. 解放军医学杂志， 2012， 37（5）： 477-481.
[2] 王又又， 向群英， 佘茜， 等. 宫颈癌高发区妇女 HPV 感染及影响因素分析[J]. 中国公共卫生， 2011， 27（3）： 259-261.
[3] Meng-lan O， Kun G A O， Li L I. 宫颈高级别病变与 HPV 感染型别分析[J]. 中国癌症防治杂志， 2012， 4（2）.
【关键词】 HPV基因分型检测 宫颈癌 临床应用
【中图分类号】 R737.33 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-5160（2015）01-0008-01
近几年来，越来越多的学者认为，宫颈癌及其癌变前的病变主要是由HR-HPV（高危型人乳头瘤病毒）的持续感染所引起的[1]，在2005年召开的中国子宫颈癌会议上，明确提出：HPV感染是导致宫颈癌病变的必要、关键因素。HPV分型很多，其致病性与HPV的分型紧密相关，故HPV基因的分型检测对宫颈癌的筛查、预防、治疗及预后都具有非常重要的价值[2]。
1 资料与方法
1.1 一般资料
收集2012年1月～2014年1月我院妇产科液基细胞学标本120例，其中43例正常细胞学，62例ASC/AGC，10例LSIL（低度鳞状上皮内病变），5例HSIL（高度鳞状上皮内病变）;患者年龄分布为25～75岁，平均年龄为（39.5±10.2）岁;以活检标本的病理学诊断为标准，病理学分类为：84例慢性宫颈炎，18例CIN1（宫颈上皮内瘤变低度），10例CIN2（宫颈上皮内瘤变高度），4例CIN3（宫颈上皮内瘤变高度），4例SCC（宫颈鳞状细胞癌）。
1.2 方法
采用美国应用生物系统公司（ABI）生产的PCR扩增仪、杂交仪、人乳头瘤病毒分型基因检测系统。应用上海伟进生物科技有限公司生产的DNA抽提试剂盒，反向点杂交探针，通用引物PCR，β-action引物PCR，生物素标记引物。根据仪器和试剂的操作说明书进行HPV基因的分型检测。
1.3 统计学方法
应用SPSS20.0软件包进行数据处理，计数资料采用x2检验，当P<0.05时差异具有统计学意义。若患者多重感染则计算基因型阳性率时采用重复计算。
2 结果
2.1 HPV基因分型检测结果
本研究中，正常细胞学的阳性率为20.9%（9/43），ASC/AGC的阳性率为75.8%（47/62），LSIL的阳性率为80.0%（8/10），HSIL的阳性率为100.0%（5/5）;病理学分类，慢性宫颈炎的阳性率为42.9%（36/84），CIN1的阳性率为83.3%（15/18），CIN2的阳性率为100.0%（10/10）， CIN3的阳性率为100.0%（4/4），SCC的阳性率为100.0%（4/4）。
2.2 HPV感染的基因亚型分布及其和宫颈病变严重程度的关系
本研究120例液基细胞学标本中，HPV病毒的感染率为57.5%（69/120）。HPV单一型感染率为37.5% （45/120），HPV二重感染率为10.0%（12/120），HPV三重感染率为5.0%（6/120），HPV四重感染率为1.7%（2/120），HPV五重感染率为3.3%（4/120）。总计检测出16种HPV病毒亚型，排在前五的依次为：HPV16亚型（44.9%），HPV58亚型（20.3%），HPV18亚型（17.4%），HPV52亚型（14.5%），HPV31亚型（10.1%）。HPV感染的基因亚型和宫颈病变严重程度的关系见表1。
表1 HPV亚型和宫颈病变严重程度的关系
2.3 CIN病变严重程度不同的组织中HR-HPV的多重感染情况
本文中，正常细胞学2例，ASC16例，LSIL4例，HSIL2例，总计24例检测结果为多重HPV感染，这24例患者的病理学结果为：慢性宫颈炎10例，10例CIN1，2例CIN2，2例SCC。其中合并HPV16亚型感染的多重感染患者有11例，合并HPV58亚型感染的多重感染患者有8例，合并HPV18亚型感染的多重感染患者有4例，合并HPV31亚型感染的多重感染患者有4例。
2.4 HPV感染患者人口学特征
以中位年龄作为分界点，考察HPV感染患者的人口学特征。发现农村和年龄高患者发生CIN2、CIN3和SCC概率较高。
*P<0.05
3 讨论
本研究进一步证实：HPV病毒感染，尤其HPV高危病毒的感染是导致宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈癌的第一因素。本文中，正常细胞学、ASC/AGC、LSIL、HSIL的阳性率分别为20.9%、75.8%、80.0%、100.0%;病理学分类，慢性宫颈炎、CIN1、CIN2、CIN3、SCC的阳性率分别为42.9%、83.3%、100.0%、100.0%、100.0%（4/4）。HR-HPV的感染率随着宫颈病变的严重程度的增加而增加，CIN2、CIN3、SCC的患者HPV阳性率达到100%。上述数据表面，HPV病毒感染和宫颈病变的严重程度呈正相关性。
HPV感染是导致宫颈癌病变的必要因素，是筛查宫颈癌的重要指标。HPV分型很多，因为其致病性与HPV的分型紧密相关，故HPV基因的分型检测对宫颈癌的筛查、预防、治疗及预后都具有非常重要的价值，可帮助评估和管理类宫颈异常细胞学，作为病程进展的判断指标，还可为HPV病毒疫苗的研制提供理论依据。
本研究中，69例HPV感染中有24例为多重感染。其中合并HPV16亚型感染的多重感染患者最多，有11例。有研究表明：HPV多重感染和宫颈病变的严重程度呈现出相关性，且多重感染的患者病情进展为宫颈癌的几率高于单一型感染者[3]。本研究中，混合性HPV感染的患者CIN发病率显著高于单一型感染（P<0.05）。（感染者的年龄和地域性差异没有体现）表明：HPV混合感染可能对宫颈上皮内瘤变的病发和进展存在辅助及累加的作用。
总之，HPV基因分型检测可有效分析HPV病毒感染，对宫颈癌的筛查、预防、治疗及预后都具有非常重要的意义，具有临床应用价值。
参考文献
[1] 马晓星， 李亚里， 胡凌云， 等. HR-HPV 载量与宫颈病变的相关性分析[J]. 解放军医学杂志， 2012， 37（5）： 477-481.
[2] 王又又， 向群英， 佘茜， 等. 宫颈癌高发区妇女 HPV 感染及影响因素分析[J]. 中国公共卫生， 2011， 27（3）： 259-261.
[3] Meng-lan O， Kun G A O， Li L I. 宫颈高级别病变与 HPV 感染型别分析[J]. 中国癌症防治杂志， 2012， 4（2）.