【摘 要】
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目的:观察姜黄素(curcumin)对N2a/APP695swe细胞线粒体形态和功能及细胞凋亡的影响;探讨其可能的神经保护机制。方法:实验细胞分为4个组:N2a/APP695组(WT)、N2a/APP695swe组(
【机 构】
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重庆医科大学基础医学院病理学教研室; 重庆医科大学神经科学研究中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:81671261)
论文部分内容阅读
目的:观察姜黄素(curcumin)对N2a/APP695swe细胞线粒体形态和功能及细胞凋亡的影响;探讨其可能的神经保护机制。方法:实验细胞分为4个组:N2a/APP695组(WT)、N2a/APP695swe组(APP)、溶剂对照组(DMSO,5μmol/L)、姜黄素组(Curcumin,5μmol/L)。流式细胞术分别检测细胞凋亡、活性氧水平和膜电位水平、免疫细胞化学检测细胞色素C的表达、电镜观察细胞线粒体形态的改变,Western blot检测Caspase3、Caspase9蛋白表达,分光光度检测Caspase3、Caspase9酶活性。结果:流式细胞术结果显示,Curcumin组细胞的凋亡率、活性氧水平较APP组明显降低[(0.05±0.01)vs.(0.18±0.01),P=0.000;(49.67±4.16)vs.(197.67±8.08),P=0.000];而Curcumin组线粒体膜电位较APP组升高[(1.00±0.03)vs.(0.64±0.03),P=0.000]。电镜结果发现姜黄素可以减轻线粒体的肿胀,改善其形态。同时免疫细胞化学结果显示姜黄素减少了细胞色素C的释放。Western blot检测发现,与APP组相比,Curcumin组Caspase3、Caspase9蛋白的表达均降低[(0.62±0.12)vs.(1.39±0.10),P=0.000;(0.64±0.20)vs.(1.78±0.03),P=0.000];并且Curcumin组较APP组的Caspase3与Caspase9的活性明显降低[(0.66±0.04)vs.(2.12±0.06),P=0.000;(0.58±0.04)vs.(0.93±0.03),P=0.000]。结论:姜黄素能抑制N2a/APP695swe细胞的凋亡,其机制可能与改善线粒体功能有关。
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