【摘 要】
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目的培育一种HBeAg转基因小鼠新品系。方法克隆乙型肝炎病毒HBeAg基因;采用CRISPR/Cas9技术,通过同源重组的方式分别在Rosa26基因位点定点插入pliver-HBeAg表达框,获得含有HB
【机 构】
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西安交通大学第二附属医院病理科,西安交通大学第二附属医院生物诊断治疗国家地方联合工程研究中心,西安交通大学第二附属医院检验科
【基金项目】
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国家自然科学基金(NSFC30872403),教育部新世纪优秀人才计划(NCET-10-0647),陕西省科技统筹创新工程计划(2011KTCL03-14).
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目的培育一种HBeAg转基因小鼠新品系。方法克隆乙型肝炎病毒HBeAg基因;采用CRISPR/Cas9技术,通过同源重组的方式分别在Rosa26基因位点定点插入pliver-HBeAg表达框,获得含有HBeAg基因的表达载体pliver-HBeAg,经酶切得到含有HBeAg基因的线性DNA片段,将Cas9mRNA、gRNA和donor vector显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,再将其移植入C57BL/6J雌性代孕小鼠子宫,获得F0代建系小鼠;采用长片段PCR对出生小鼠进行鉴定,共获得HBeAg
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