【摘 要】
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目的 探讨clusterin前导序列在抗前列腺癌细胞凋亡中的作用.方法培养转染全长clusterin序列的LNCaP细胞(简称A)及缺少前导序列clusterin的LNCaP细胞(简称B)为试验组,培养野生型(简称L)及转染PIRES2-EGFP永久表达载体的LNCaP细胞(简称M)为对照组,RT-PCR法检测4组细胞的clusterin mRNA水平.以TNF-α进行诱导,检测L组细胞clust
【机 构】
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100034,北京大学第一医院、北京大学泌尿外科研究所,100034,北京大学第一医院、北京大学泌尿外科研究所,100034,北京大学第一医院、北京大学泌尿外科研究所,100034,北京大学第一医院、
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目的 探讨clusterin前导序列在抗前列腺癌细胞凋亡中的作用.方法培养转染全长clusterin序列的LNCaP细胞(简称A)及缺少前导序列clusterin的LNCaP细胞(简称B)为试验组,培养野生型(简称L)及转染PIRES2-EGFP永久表达载体的LNCaP细胞(简称M)为对照组,RT-PCR法检测4组细胞的clusterin mRNA水平.以TNF-α进行诱导,检测L组细胞clusterin mRNA的变化,MTT及ELISA法检测4组细胞的增殖活性与凋亡情况.结果B、A组细胞clusterin mRNA水平均显著高于L、M组(P均＜0.01);B、A组间差异无显著性意义(P＞0.05).TNF-α作用2 h时,与对照组(A=12 732.0±51.1)相比L组细胞clusterin mRNA有一过性升高(A=15 642.0±64.3),t=-77.106,P＜0.01;12、24 h mRNA显著降低(A=11705.3±30.7,9848.0±67.4,t=24.890,48.020,P均＜0.01);TNF-α作用24 h后,A组细胞存活比例(0.7597±0.0251)显著高于B组细胞(0.6697±0.0185)及对照组(0.6808±0.0222,0.6991±0.0291),P均＜0.01;A组细胞凋亡程度(A=0.3265±0.0387)显著低于B组细胞(A=0.5650±0.0324)及对照组(A=0.5892±0.0418,0.6236±0.0311,P均＜0.05).结论分泌至细胞外间隙的clusterin可发挥抗凋亡作用,而聚集于细胞内的clusterin无抗凋亡作用,前导序列存在是clusterin抗前列腺癌细胞凋亡的前提。
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