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人TIMP-2基因的克隆及其原核表达

来源 :贵州医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：muteng12

【摘 要】

：

目的构建人TIMP-2重组表达载体,并在大肠杆菌BL21（DE3）中表达。方法提取人肝癌细胞（Hep G2）总RNA后,经RT-PCR扩增获得目的片段,插入克隆载体pMD18-T;酶切鉴定和测序后将TIMP-2导

【作 者】

：

徐国强 王伟 孙达权 黄小琼 陈腾祥 

【机 构】

：

贵州医科大学生理学教研室,贵州医科大学生物化学与分子生物学教研室

【出 处】

：

贵州医药

【发表日期】

：

2016年4期

【关键词】

：

基质金属蛋白酶抑制因子2 PGEX-4T-1 原核表达 肝癌 TIMP-2pGEX-4T-1Prokaryotic expressionHepatocellul 

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目的构建人TIMP-2重组表达载体,并在大肠杆菌BL21（DE3）中表达。方法提取人肝癌细胞（Hep G2）总RNA后,经RT-PCR扩增获得目的片段,插入克隆载体pMD18-T;酶切鉴定和测序后将TIMP-2导入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组质粒pGEX-TIMP-2。将重组质粒转化至大肠杆菌菌株BL21（DE3）中,IPTG诱导融合蛋白表达后用SDS-PAGE电泳检测并用western blot验证（蛋白质印迹法）。结果成功构建原核重组表达载体pGEX-TIMP-2,并在原核宿主BL21中

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