PCDH10在非小细胞肺癌中的表达及PCDH10过表达对A549细胞功能的影响

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目的:探讨原钙黏蛋白10(protocadherin 10,PCDH10)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达情况,并探讨其在NSCLC细胞中的生物学功能及可能的分子作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR法检测PCDH10及Ki67 mRNA在NSCLC及相应癌旁组织中的表达水平,并分析其表达与临床病理特征及预后之间的关系。采用脂质体转染法将重组质粒pcDNA3.1(+)-PCDH10及空载体pcDNA3.1(+)转入肺腺癌A549细胞;然后,采用IncuCyte S3活细胞动态与分析系统检测细胞的增殖能力,FCM法检测细胞周期与凋亡水平,Transwell小室法检测细胞的迁移及侵袭能力。最后,采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Bcl-2、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、cyclinE、细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及Slug mRNA和蛋白的表达水平。结果:PCDH10 mRNA在NSCLC组织中的表达水平明显低于其在癌旁组织中的表达水平(P <0.001);PCDH10 mRNA的表达与NSCLC的T分期、淋巴结转移、TNM分期及Ki67 mRNA表达负相关(P值均<0.001),与患者预后正相关(P <0.001)。PCDH10过表达可通过诱导A549细胞发生G1期阻滞及促进细胞凋亡,抑制细胞的增殖(P值均<0.05),并能抑制A549细胞的迁移及侵袭能力(P值均<0.01);PCDH10过表达A549细胞中PCNA、Bcl-2、cyclin D1、cyclin E、CDK4和Slug mRNA及蛋白的表达水平均较空载体对照组明显下调(P值均<0.05),仅有E-cadherin mRNA及蛋白的表达水平明显上调(P值均<0.01)。结论:PCDH10在NSCLC组织中低表达,PCDH10过表达可抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭。
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