miRNA-145对白血病HuT 78细胞凋亡的影响及其机制研究

来源 :中国实验血液学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenshuae5b
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目的:探讨miRNA-145对白血病细胞凋亡的影响及其机制.方法:利用Lipofectamine 2000脂质体将miRNA-145模拟物(mimic)及阴性对照转染至白血病细胞后,采用MTT实验检测miR-145对细胞增殖能力的影响,采用流式细胞术检测miR-145对白血病细胞的细胞周期及凋亡影响,采用Western blot实验检测BCL-2、CDK6、Cyclin D1、BAX、PI3K、p-PI3K、p-AKT及AKT表达水平.结果:miR-145模拟物转染HuT 78细胞后,miR-145模拟物相对水平为2.3±0.2,显著高于空白对照组及miR-NC组(P<0.05).miR-145模拟物转染至HuT78细胞后,HuT 78细胞增殖水平明显低于空白对照及miR-NC组(P<0.05).转染miRNA-145模拟物后可促使HuT 78细胞的G0/G1期细胞数量增多,S期及G2/M期细胞数量显著减少(P<0.05).AnnexinV/PI双染流式细胞术实验发现,转染miRNA-145模拟物后HuT 78细胞凋亡率为17.6%±3.4%,显著高于对照组及miRNA-NC组(P<0.05).miR-145模拟物可显著降低HuT 78细胞内BCL-2、CDK6、Cyclin D1的表达水平(P<0.05);miR-145模拟物可使HuT 78细胞内BAX表达水平增高(P<0.05).HuT 78细胞转染miR-145模拟物后,HuT78细胞的PI3K、p-PI3K、AKT及p-AKT的表达显著低于空白对照及miR-NC组(P<0.05).结论:上调miR-145可抑制白血病细胞的增殖能力,并促进细胞发生凋亡,其机制可能与PI3K/AKT信号通路受到抑制有关.
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