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目的
建立一种快速检测肠道病毒71型(EV71)IgM抗体的均相ELISA新技术。
方法首先克隆表达纯化EV71 VP1蛋白，使用生物素标记该蛋白。通过ELISA法摸索出Bio-EV71 VP1的最适抗原量为0.0375 μg。优化供体微球、受体微球、血清等实验反应体系，建立EV71 VP1的均相酶联免疫检测方法的IgM检测技术。使用EV71感染的手足口病(HFMD)患者和健康人血清进行均相酶联免疫检测方法检测评价，并与ELISA检测结果相比较。
结果获得EV71 VP1纯化蛋白并生物素化。摸索出均相酶联免疫检测方法的体系：5 μg/ml受体微球、0.037 5 μg生物素化的VP1、20 μg/ml供体微球、血清2 μl，总体系为20 μl。采用ELISA和均相酶联免疫检测方法检测方法对样本血清进行IgM检测。两种方法同时检出手足口病患者lgM阳性16份；14份ELISA法检出阴性样本中，均相酶联免疫检测方法法检出阳性6份。20份健康人血清，2种方法检测结果均为阴性。
结论本研究初步建立了EV71 VP1 IgM的均相酶联免疫检测方法。