【摘 要】
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比对香菇(Lentinula edodes)Atg8蛋白基因的同源序列,经反转录PCR确定香菇Atg8的外显子序列。构建其表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)ply S获得其表达菌株。采用镍柱和Mono Q
【机 构】
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西南林业大学生命科学学院,中国农业大学生物学院,
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比对香菇(Lentinula edodes)Atg8蛋白基因的同源序列,经反转录PCR确定香菇Atg8的外显子序列。构建其表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)ply S获得其表达菌株。采用镍柱和Mono Q纯化表达的Atg8蛋白,成功制备兔多隆抗体。通过western-blotting对转色前后Atg8蛋白的表达量进行对比。香菇Atg8蛋白基因长度为603 bp,Atg8蛋白分子量25 k Da左右,且为可溶性蛋白。转色后的香菇Atg8蛋白杂交条带较微弱,而转色前杂交条带几乎没有。表明转色后的香菇菌丝Atg8表达量比转色前含量高。
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