番茄叶片液泡转化酶基因植物反义表达载体的构建与瞬时表达

来源 :西北农林科技大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：dengzk

【摘要】

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在分析植物液泡转化酶基因保守区序列的基础上,设计1对PCR引物,以番茄（中蔬四号）叶片总RNA的反转录产物为模板,扩增出长为668 bp的cDNA片段,并克隆入pMD-18 T simple载体.测序

【作者】

：

程智慧吴正景孟焕文许小勇

【机构】

：

西北农林科技大学园艺学院,河南科技大学林学院

【出处】

：

西北农林科技大学学报(自然科学版)

【发表日期】

：

2007年4期

【关键词】

：

番茄液泡转化酶反转录PCR 反义表达载体构建瞬时表达

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在分析植物液泡转化酶基因保守区序列的基础上,设计1对PCR引物,以番茄（中蔬四号）叶片总RNA的反转录产物为模板,扩增出长为668 bp的cDNA片段,并克隆入pMD-18 T simple载体.测序结果表明,所获得的片段为番茄液泡转化酶基因TIV1的片段;PCR和酶切分析表明,该片段已成功定向连人到双元载体pBinAR的CaMV 35S启动子和OCS终止子间,构建成反义植物表达载体pBinAR-aTIV1;菌落PCR表明质粒成功转化入农杆菌EHA105;瞬时表达证明该反义片段对番茄叶片液泡转化酶活性具有

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