【摘 要】
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目的:探讨小干扰RNA (small interference RNA,siRNA)靶向干扰白细胞介素28受体α(interleukin 28 receptor alpha,IL28RA)基因对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用.方法:设计
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院老年医学科,江苏南京,210029;南京医科大学第一附属医院心脏科,江苏南京,210029
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目的:探讨小干扰RNA (small interference RNA,siRNA)靶向干扰白细胞介素28受体α(interleukin 28 receptor alpha,IL28RA)基因对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用.方法:设计合成干扰IL28RA基因表达的3对siRNA(siRNA-6158、siRNA-6160、siRNA-6162),采用脂质体转染原代乳大鼠心肌细胞,分为正常对照组、单纯缺氧复氧组、缺氧复氧+阴性对照转染组、缺氧复氧+siRNA-6158转染组、缺氧复氧+siRNA-6160转染组、缺氧复氧+siRNA-6162转染组,探索siRNA转染心肌细胞的合适浓度,检测心肌细胞存活率、培养液中LDH的水平及心肌细胞IL28RA蛋白表达,观察siRNA干扰IL28RA基因对心肌细胞缺氧复氧过程中的保护作用.结果:采用脂质体转染法,siRNA浓度在80 nmol/L对心肌细胞具有较高的转染效率.与单纯缺氧复氧组和缺氧复氧+阴性对照转染组比较,缺氧复氧+siRNA-6158转染组和缺氧复氧+siRNA-6160转染组的LDH活性明显降低(P＜0.05),心肌细胞存活率明显升高(P＜0.05),IL28RA蛋白表达明显减少(P＜0.05).结论:干扰IL28RA基因的表达有望成为保护缺氧复氧心肌损伤的重要手段.
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