表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白重组伪狂犬病毒的构建及其生物学特性分析

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将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)CH-1a株GP5基因插入到伪狂犬病病毒(Pseudorabies Virus,PRV)Bartha-K61株TK基因中,获得了一株TK-/gE-表型的重组伪狂犬病病毒,命名为rPRV-GP5.经生长动力学、表达动力学和间接免疫荧光证实PRRSV GP5在重组病毒中获得了表达,表达蛋白的抗原性与亲本病毒相似,rPRV-GP5在不同的细胞上毒价和细胞病变与Bartha-K61比较无显著差异.4只PRV抗体阴性的绵羊,每只接种106.0 PFU的 rPRV-GP5 可以完全抵抗103 LD50伪狂犬病强毒S株的攻击.10头PRV、PRRSV抗体阴性的仔猪滴鼻接种rPRV-GP5 107.0 PFU/头并在接种后63 d攻击PRRSV CH-1a 株105.0 TCID50/头,攻毒后3 d和5 d出现了PRRSV荧光抗体和ELISA抗体,在攻毒后14 d检测到了PRRSV中和抗体,Bartha-K61活疫苗组和对照组至实验结束时仍未检测到PRRSV中和抗体.这说明rPRV-GP5免疫产生了针对PRRSV的回忆性免疫应答.
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