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目的探讨运用"三阶段法"分离培养与鉴定人脐血间充质干细胞的效果。方法取人脐带血4份,经过3个阶段(去除红细胞阶段、短暂培养阶段、持续培养阶段),以完全低糖DMEM(含20%胎牛血清)为培养基,纯化分离人脐血间充质干细胞。传代至第3代通过流式细胞仪和间充质干细胞诱导分化为成骨细胞进行鉴定。结果 4份人脐血中3份分离出间充质干细胞。分离培养的细胞经流式细胞仪检测不表达造血细胞的抗原(CD34-),表达间充质干细胞的抗原(CD29+、CD44+、CD105+),并能向成骨细胞方向分化。结论 "三阶段法"能够简便、有效地从人脐血中分离出间充质干细胞。