牛源致病性大肠杆菌floR基因的克隆、表达及其抗体的制备

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jigmei123

【摘要】

：

将耐氟苯尼考大肠杆菌的floR基因部分基因片段插入pGEX-4T-2原核表达载体中,构建以BL21（DE3）Codon Plus为宿主菌的原核表达体系。通过优化诱导条件,确定了floR1基因能在pGEX/BL

【作者】

：

吴蓓蓓沈建忠

【机构】

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浙江大学,中国农业大学

【出处】

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畜牧兽医学报

【发表日期】

：

2008年9期

【关键词】

：

氟苯尼考基因克隆 floR基因原核表达 florfenicol gene cloning floR gene prokaryote expressi

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目资助（30170715）,国家“十一五”科技支撑计划项目（2006BAK02A03）

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将耐氟苯尼考大肠杆菌的floR基因部分基因片段插入pGEX-4T-2原核表达载体中,构建以BL21（DE3）Codon Plus为宿主菌的原核表达体系。通过优化诱导条件,确定了floR1基因能在pGEX/BL21（DE3）codon plus中高效表达,且表达的重组蛋白为包涵体形式。对包涵体进行溶解复性后,将复性融合蛋白过GST亲和层析柱得到纯化的GST-FloR1融合蛋白。并以GST-FloR1融合蛋白为抗原免疫小鼠,成功制备出抗GST-FloR1融合蛋白的抗体。抗体的制备为FloR蛋白定位及其对氟苯尼

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