【摘 要】
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ANS为花青素植物花青素合成途径末端的关键酶基因.本研究从东方百合中克隆了 3个ANS同源基因,并通过碱基和氨基酸的差异分析了该基因的转录水平和表型效应.为进一步研究百合ANS的特性,完善百合花色形成的分子机制提供理论依据.选取东方百合\'西伯利亚\'品种为材料,通过同源克隆技术鉴定了 LsANS1、LsANS2、LsANS3,并分别构建其过表达载体;利用花序侵染法转化拟南芥,经潮霉素抗性筛选及分子检测以获得阳性植株;利用电子解剖镜观察和RT-qPCR定量分析表达量差异,验证野生型与转基因植株后代
【机 构】
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福建省农业科学院生物技术研究所,福州,350003
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ANS为花青素植物花青素合成途径末端的关键酶基因.本研究从东方百合中克隆了 3个ANS同源基因,并通过碱基和氨基酸的差异分析了该基因的转录水平和表型效应.为进一步研究百合ANS的特性,完善百合花色形成的分子机制提供理论依据.选取东方百合\'西伯利亚\'品种为材料,通过同源克隆技术鉴定了 LsANS1、LsANS2、LsANS3,并分别构建其过表达载体;利用花序侵染法转化拟南芥,经潮霉素抗性筛选及分子检测以获得阳性植株;利用电子解剖镜观察和RT-qPCR定量分析表达量差异,验证野生型与转基因植株后代的表型差异水平.结果显示,LsANS1与LsANS3高度同源,转基因阳性植株主茎明显为红色,可能是吗啡合成 N-端的非血红素加氧酶(non-haem dioxygenase in morphine synthesis N-terminal,DIOX_N)亚家族结构域上的个别碱基的变异导致基因表达水平变化从而引起表型差异;LsANS2与其他两个同源基因存在氨基酸序列上的差异,且基因表达水平也远远低于其他两个同源基因,在转基因植株中呈粉红色.
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