【摘 要】
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目的探索活血化瘀药对“大黄-桃仁”(Rhubarb - Peach kernel,RP)对子宫腺肌病(Adenomyosis,AM)小鼠子宫内膜细胞的动力学特征的调控作用。方法:体外培养hEM-15A细胞,MTT实验及Transwell实验检测RP处理后细胞活力、增殖及迁移能力变化。采用同种异体垂体移植建立AM小鼠模型,随机分为空白对照组、模型组及药物治疗组,采用热板痛及机械痛觉过敏实验检测治疗疗
【机 构】
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三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理肿瘤科研三级实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81973897)大黄-桃仁药对调控子宫腺肌病乏氧线粒体稳态的机制研究;
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目的探索活血化瘀药对“大黄-桃仁”(Rhubarb - Peach kernel,RP)对子宫腺肌病(Adenomyosis,AM)小鼠子宫内膜细胞的动力学特征的调控作用。方法:体外培养hEM-15A细胞,MTT实验及Transwell实验检测RP处理后细胞活力、增殖及迁移能力变化。采用同种异体垂体移植建立AM小鼠模型,随机分为空白对照组、模型组及药物治疗组,采用热板痛及机械痛觉过敏实验检测治疗疗效、HE染色观察病理浸润程度。透射电镜观察细胞动力学特征变化,免疫荧光染色检测微丝蛋白骨架调节酶Rho GTP酶成员A(Ras homolog gene family, member A,RhoA)、Rho激酶(Rhokinase 1,Rock1)、Ras相关的C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)、细胞分裂周期蛋白42(Cell division cycle 42,Cdc42)的表达水平及细胞定位。结果:RP显著抑制hEM-15A细胞的异常增殖,并呈浓度依赖性;经1mg/ml RP处理后,细胞迁移及侵袭能力显著下降。动物实验表明,与模型组比较,经RP治疗后小鼠热板痛及机械痛反应时间显著缩短,病理浸润程度减轻。电镜结果表明,与空白组比较,模型组小鼠子宫内膜上皮细胞排列紊乱、体积缩小,细胞形态由柱状变为梭形或不规则形;细胞间紧密连接、桥粒连接及细胞周边指状突起减少,细胞膜局部形成皱褶,经RP治疗后上述动力学特征变化改善。免疫荧光染色结果显示,RhoA、Rock1、Rac1、Cdc42可定位表达于子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞及平滑肌细胞。与对照组比较,模型组小鼠Rho GTP酶的表达显著上调,经RP治疗后回调。结论:AM子宫内膜上皮细胞动力学特征发生改变,有助于其从静止态向迁移状态转化。RP对AM的治疗机制与Rho GTP酶调控AM动力学特征、从而抑制细胞异常运动能力有关。
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