【摘 要】
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目的:探讨miR-520h对缺氧状态下人牙周膜细胞(HPDLCs)MMP-2表达的影响。方法:将HPDLCs置于1%氧浓度的孵箱中培养0、12、24、48和72 h。用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)和Weste
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目的:探讨miR-520h对缺氧状态下人牙周膜细胞(HPDLCs)MMP-2表达的影响。方法:将HPDLCs置于1%氧浓度的孵箱中培养0、12、24、48和72 h。用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)和Western blot检测细胞中MMP-2 mRNA和蛋白的表达。构建野生型和突变型MMP-2表达载体,用TargetScan和miRanda等软件预测作用于MMP-2基因3’-UTR靶向miRNA,双荧光素酶报告基因检测系统验证靶向MMP-2 3’-非翻译区(3’-UTR)的miRNA。用qRT-PCR和Western blot技术检测miR-520h对MMP-2表达的调控。结果:HPDLCs在缺氧培养中MMP-2 mRNA和蛋白的表达量明显下调(P<0.01)。软件预测在MMP-2的3’-UTR 516bp位置有一个与miR-520h的结合位点,HPDLCs被转染pre-miR-520后,其表达量增高(P<0.01),MMP-2载体的荧光素酶活性降低(P<0.05)。miR-520h都抑制了HPDLCs中MMP-2 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论:miR-520h可抑制缺氧状态下牙周膜细胞MMP-2基因表达。
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