观察下调激素受体相关受体α(ERRα)表达后奥沙利铂处理结肠癌细胞株增殖及凋亡变化并探讨其机制。
方法结肠癌细胞株Colo-205、HCT-116、SW620及HT-29采用贴壁细胞法进行培养,按照给予的干预方式分为在奥沙利铂处理后分别给予ERRα抑制剂XCT790的XCT790-OHP-HCT-116组、给予siERRα转染HCT-116细胞下调ERRα表达的siERRα-OHP-HCT-116组及奥沙利铂干预组(OHP-HCT-116组),对照组为未给予干预的无干预组(NC组)。试验另分为给予siERRα转染HCT-116细胞下调ERRα表达的siERRα组和以siNegative Control进行转染的阴性对照组(siNC组)。以Western blot法和实时定量(qRT)-PCR法检测结肠癌细胞ERRα蛋白和mRNA水平表达,以ERRα抑制剂XCT790及siERRα下调ERRα表达,流式细胞术及甲基噻唑基四唑法检测结肠癌细胞凋亡及增殖。Western blot法、qRT-PCR检测细胞凋亡及增殖相关基因蛋白及mRNA表达。
结果ERRα蛋白及mRNA在HCT-116中高于Colo-205、SW620及HT-29细胞株(P均<0.05);XCT790-OHP-HCT-116组细胞早期凋亡率高于NC组及OHP-HCT-116组(P均<0.05),XCT790-OHP-HCT-116组细胞培养72、96 h存活率低于NC组及OHP-HCT-116组(P均<0.05)。采用siERRα转染HCT-116细胞下调ERRα表达后,siERRα-OHP-HCT-116组早期凋亡率低于NC组及OHP-HCT-116组(P均<0.05),siERRα-OHP-HCT-116组细胞培养72、96 h后存活率低于NC组及OHP-HCT-116组(P均<0.05);给予siERRα转染HCT-116细胞,与siNC组对比,siERRα组YAP1、p73、p63、MDM2、Capase 8、Capase 9蛋白水平下调(P均<0.01),mRNA水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。
结论下调ERRα表达促进结肠癌细胞凋亡抑制增殖,增强奥沙利铂对结肠癌细胞的杀伤作用。