【摘 要】
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目的 检测类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）患者滑膜成纤维细胞（rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes, RA-FLS）分子伴侣介导自噬（chaperone-mediated autophagy, CMA）水平，探究其与RA病情发生发展的关系。方法 从手术室中收取8例RA患者膝关节滑膜组织，培养原代滑膜细胞；
【基金项目】
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四川省卫计委项目基金（18ZD009）～～；
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目的 检测类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）患者滑膜成纤维细胞（rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes, RA-FLS）分子伴侣介导自噬（chaperone-mediated autophagy, CMA）水平，探究其与RA病情发生发展的关系。方法 从手术室中收取8例RA患者膝关节滑膜组织，培养原代滑膜细胞；同期收取8例骨关节炎（osteoarthritis, OA）患者膝关节滑膜组织，培养骨关节炎滑膜成纤维细胞（osteoarthritis fibroblast-like synoviocytes, OA-FLS）作为对照。采用RT-qPCR检测RA-FLS与OA-FLS中CMA标志性因子Hsc70、LAMP2A mRNA水平；Western blot法检测两组细胞中Hsc70、LAMP2A蛋白水平。采用免疫荧光细胞化学染色检测RA-FLS中Hsc70、LAMP2A蛋白及共定位表达。采用Pearson法分析Hsc70、LAMP2A蛋白与RA患者临床指标DAS28、血沉（erythrocyte sedimentation rate, ESR）、C反应蛋白（C-reactive protein, CRP）、类风湿因子（rheumatoid factor, RF）的相关性。结果 RA-FLS组Hsc70与LAMP2A mRNA（1.05±0.15和1.01±0.06）和蛋白水平（1.02±0.08和1.07±0.03）均明显高于OA-FLS（分别为0.51±0.10和0.63±0.08、0.78±0.06和0.61±0.08）对照组（P＜0.05）;免疫荧光结果显示，RA-FLS中代表Hsc70蛋白的红色荧光和代表LAMP2A蛋白的绿色荧光明显更强，红绿荧光融合后的黄色荧光斑点也显著高于对照组。Pearson相关性分析结果显示，Hsc70蛋白水平与RA患者DAS28得分呈正相关（r=0.775 6）,LAMP2A蛋白水平与RA患者DAS28得分、ESR呈正相关（分别r=0.750 7、r=0.779 0）。结论 RA患者Hsc70、LAMP2A表达上调，CMA途径被激活，且与RA患者的病情活动度呈正相关。
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