观察微小RNA(miRNA,miR)-21对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响及对程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)表达的调控作用。
方法反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测前列腺癌细胞LNCap、PC-3、DU145及人正常前列腺上皮细胞RWPE-1中miR-21表达,脂质体Lipofectamine™2000将miR-21 inhibitor和miR-21 NC转入PC-3细胞中,48 h后,RT-PCR检测miR-21表达,MTT法检测细胞活力,流式细胞术分别检测细胞凋亡及细胞周期,RT-PCR及Western blot检测PDCD4蛋白及mRNA的表达。
结果前列腺癌细胞LNCap、DU145及PC-3(0.36±0.03、0.85±0.08、1.09±0.10)中miR-21的表达量高于人正常前列腺上皮细胞RWPE-1中的表达量(0.17±0.02,P=0.013,P=0.007,P=0.001)。与miR-21 NC组比较,miR-21 inhibitor组miR-21表达量(0.20±0.02比1.07±0.10)显著降低(P=0.006),PC-3细胞活力(0.37±0.04比0.75±0.07)下降(P=0.006),细胞早期凋亡率[(20.40±1.97)%比(2.53±0.24)%]及晚期凋亡[(16.56±1.65)%比(2.53±0.24)%]均提高(P=0.002,P=0.003),细胞周期G1期延长[(59.58±3.26)%比(47.33±4.35)%](P=0.000),同时PDCD4蛋白(1.67±0.16比0.25±0.02)及mRNA(1.02±0.10比0.24±0.02)表达量显著提高(P=0.005,P=0.007)。
结论降低miR-21表达能通过上调PDCD4表达抑制PC-3细胞增殖及细胞周期进展。