【摘 要】
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目的 建立一种高灵敏度、高特异性的蓝舌病毒RNA荧光定量RT-PCR检测技术,能够检测不同血清型蓝舌病毒(Blue tongue virus,BTV)。方法 应用改良的BTV双链RNA变性方法,针对
【机 构】
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武汉大学动物实验中心/ABSL-3实验室,湖北武汉430071武汉大学基础医学院病毒学研究所,湖北武汉430071
【出 处】
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第十四届中南地区实验动物科技交流会
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目的 建立一种高灵敏度、高特异性的蓝舌病毒RNA荧光定量RT-PCR检测技术,能够检测不同血清型蓝舌病毒(Blue tongue virus,BTV)。方法 应用改良的BTV双链RNA变性方法,针对BTV基因组片段1和5的相对保守序列设计2对特异性引物,建立了BTV荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法进行灵敏度、特异性、重复性评价。结果 该方法能检测11种不同血清型BTV,其灵敏度可达到10 copies/μl；使用所设计引物的荧光定量PCR能特异地扩增BTV,其Ct值差异较小,并与阴性对照EHDV-5无交叉反应；重复检测CV小于5％。结论 该检测方法具有灵敏度高,特异性强等优点,适用于BTV的快速检测和诊断。
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