【摘 要】
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[目的]探讨miR-146a对人糖尿病视网膜色素上皮细胞(hRPE)损伤的影响及靶向调控机制.[方法]以高糖培养hRPE构建糖尿病hRPE损伤模型,hRPE中转染miR-146a mimics,用高糖培养液培
【机 构】
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荆门市第二人民医院眼科,湖北 荆门,448000;荆门市第二人民医院病案科,湖北 荆门,448000
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[目的]探讨miR-146a对人糖尿病视网膜色素上皮细胞(hRPE)损伤的影响及靶向调控机制.[方法]以高糖培养hRPE构建糖尿病hRPE损伤模型,hRPE中转染miR-146a mimics,用高糖培养液培养以后,Realtime PCR检测miR-146a表达变化.黄嘌呤氧化法检测SOD活性,硫代巴比妥酸法检测MDA含量.流式细胞术检测细胞凋亡.靶基因预测白介素1受体相关激酶1(IRAK1)可能是miR-146a的靶基因,构建荧光素酶报告系统鉴定靶向关系.以Western blot检测上调miR-146a对IRAK1表达影响.在hRPE中共转染pcDNA3.1-IRAK1和miR-146a mimics,用上述方法检测IRAK1对miR-146a调控高糖条件下hRPE中MDA、SOD和细胞凋亡的影响.[结果]高糖处理后的hRPE中miR-146a表达下调,细胞MDA含量升高,SOD活性降低,细胞凋亡率升高.miR-146a mimics转染后可以提高高糖条件下hRPE中miR-146a的表达水平,减少细胞中MDA含量,提高SOD活性,减少细胞凋亡.荧光素酶报告系统鉴定miR-146a靶向调控I-RAK1,并且上调miR-146a抑制IRAK1蛋白表达.pcDNA3.1-IRAK1和miR-146a mimics共转染可以逆转上调miR-146a对高糖条件下hRPE中MDA、SOD和细胞凋亡的影响.[结论]miR-146a靶向下调IRAK1表达减轻糖尿病hRPE损伤.
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