人脑胶质瘤CDK2干扰RNA新靶点的检验

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目的构建4个新靶点CDK2干扰RNA真核表达载体,转染人脑胶质细胞瘤SHG44细胞,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测mRNA表达,获得干扰效果最好的真核表达载体,为CDK2成为人脑肿瘤标志物提供有价值的资料。方法 (1)构建4个新靶点CDK2干扰RNA真核表达载体并用双酶切和测序鉴定;(2)用脂质体法瞬时转染上述4个载体到SHG44细胞株;(3)通过RT-PCR比较转染后CDK2mRNA表达量,选出干扰效果最好的一个载体。结果 (1)成功构建了4个新靶点CDK2干扰RNA真核表达载体即pGPU6
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