[目的]探讨不同灭菌方式对组织培养中高山羊齿孢子成活率的影响以及不同培养基对孢子萌发率的影响。[方法]利用NaClO、NaClO+酒精、升汞、升汞+酒精、升汞+NaClO、酒精这6种不同灭菌方式研究其对高山羊齿孢子成活率的影响;考虑4因素基本培养基、蔗糖、NAA、6-BA进行L₁₆（4⁴）正交设计,研究其对高山羊齿孢子萌发率的影响。[结果]6种灭菌处理中,NaClO+酒精的灭菌效果最好;酒精的灭菌效果最差;在正交实验中,以1/2MS+3%蔗糖+1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA为高山羊齿孢子萌发的最佳培养基,萌发率达63.69%,以不加任何激素的MS培养基中萌发率最低。[结论]2种不同的灭菌剂混合使用比单独使用灭菌剂的效果好;基本培养基对高山羊齿孢子萌发率的影响最大,影响顺序为:基本培养基>6-BA>蔗糖>NAA。