【摘 要】
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目的:探究长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）RP11-297P16.4对人肺腺癌细胞H1299和A549侵袭及迁移的影响。方法:利用qRT-PCR检测在肺腺癌细胞H1299、A549及人正常支气管上皮细胞HBEC中RP11-297P16.4的相对表达水平；设计合成针对RP11-297P16.4的特异性shRNA,慢病毒感染建立稳定敲低lncRNA RP11-2
【机 构】
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山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室基础医学研究中心
【基金项目】
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全国大学生创新训练项目（编号：202010114013）；
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目的:探究长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）RP11-297P16.4对人肺腺癌细胞H1299和A549侵袭及迁移的影响。方法:利用qRT-PCR检测在肺腺癌细胞H1299、A549及人正常支气管上皮细胞HBEC中RP11-297P16.4的相对表达水平；设计合成针对RP11-297P16.4的特异性shRNA,慢病毒感染建立稳定敲低lncRNA RP11-297P16.4的H1299、A549细胞；将其分为对照/H1299组、实验/H1299组、对照/A549组、实验/A549组，对照组感染shRNA-NC,实验组感染shRNA-RP11-297P16.4;qRT-PCR检测shRNA敲低效率；采用细胞划痕实验和Transwell实验检测RP11-297P16.4对肺腺癌细胞侵袭、迁移能力的影响；采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase, MMP）-2和-9的mRNA和蛋白质表达水平。结果:与对照组相比，RP11-297P16.4在肺腺癌细胞中高表达，差异有统计学意义（P＜0.001,P＜0.01）;qRT-PCR分析确定，shRNA敲低后RP11-297P16.4的mRNA表达水平显著降低（P＜0.001,P＜0.001）;划痕实验表明24 h、48 h实验组细胞伤口愈合率均低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01;P＜0.001,P＜0.001）;Transwell小室检测结果显示，实验组细胞侵袭数量显著少于对照组，差异有统计学意义（P＜0.001,P＜0.001）;qRT-PCR和蛋白印迹法结果显示，实验组细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白质表达量均低于对照组，差异具有统计学意义（均P＜0.05）。结论:lncRNA RP11-297P16.4通过促进MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白表达来增强H1299、A549细胞的侵袭和迁移能力。
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