人胃癌组织基因组文库的构建

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:w_h1983
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目的:为了分离和研究人胃癌致癌基因的结构及调控.方法:我们以c-myc癌基因扩增为指标,通过打点杂交从四对人胃癌组织及其癌旁正常组织中挑选出1例差异明显的人胃鳞状细胞癌组织,提取其基因组DNA,经Sau3A部分酶解后回收15~20kb的插入片段.用T4DNA连接酶将插段与λ噬菌体EMBL4载体臂进行重组.结果:经体外包装构建了人胃癌组织基因组文库.经滴度测定,库容量为1.1×106重组噬菌体.克隆效率为2.2×106重组体/μg DNA.重组率≥85%.结论:为进一步筛选人胃癌异常高表达的基因及其序列分析奠定了基础.
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