探讨α7烟碱乙酰胆碱受体(α7nAchR)激动剂在心肌纤维化中的作用及其机制。
方法分离培养乳鼠心肌成纤维细胞，传代培养2～4代时，分为4组：空白对照组、模型组、α7nAchR激动剂组和α7nAchR阻断剂组。空白对照组不做任何处理，模型组仅加入10－6 mol/L的血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)，α7nAchR激动剂组和α7nAchR阻断剂组分别加入5×10－6 mol/L的PNU-282987和10－6 mol/L的α7nAchR抑制剂甲基牛扁亭碱(MLA)，60 min后加入10－6 mol/L的Ang Ⅱ。水溶性四唑盐WST-1检测不同处理组心肌成纤维细胞增殖，实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测不同处理组心肌成纤维细胞中α7nAchR基因表达，Western blot法检测不同处理组心肌成纤维细胞中α7nAchR、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白表达。
结果(1)α7nAchR激动剂组心肌成纤维细胞最终吸光度(0.50±0.13)显著低于α7nAchR阻断剂组和模型组(0.75±0.10、0.63±0.11，F＝10.567，P＝0.000)，提示激动α7nAchR可抑制心肌成纤维细胞增殖。(2)α7nAchR激动剂组心肌成纤维细胞中α7nAchR mRNA和蛋白相对表达量(0.87±0.15、0.76±0.08)显著高于α7nAchR阻断剂组(0.45±0.09、0.40±0.14)、模型组(0.62±0.11、0.59±0.10)和空白对照组(0.32±0.13、0.30±0.07，F＝25.402，P＝0.000)，提示α7nAchR激动剂可上调心肌成纤维细胞中α7nAchR基因表达。(3)α7nAchR激动剂组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白、α-SMA蛋白、p-p38MAPK蛋白相对表达量(0.53±0.09、0.50±0.12、0.38±0.08、0.27±0.09)均低于模型组(0.65±0.12、0.62±0.10、0.57±0.11、0.45±0.11)和α7nAchR阻断剂组(0.81±0.13、0.71±0.11、0.70±0.10、0.68±0.08)，而高于空白对照组(0.41±0.08、0.35±0.06、0.19±0.07、0.16±0.07，F＝29.647、32.962、30.549、53.665，P＝0.000、0.000、0.000、0.000)，α7nAchR激动剂组p38MAPK蛋白相对表达量(0.71±0.12)高于模型组(0.52±0.10)和α7nAchR阻断剂组(0.35±0.09)，而低于空白对照组(0.85±0.14，F＝44.347，P＝0.000)。
结论α7nAchR激动剂可抑制心肌成纤维细胞增殖，减少细胞间胶原蛋白合成，其机制可能与抑制p38MAPK信号通路活化有关。