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目的:建立定量检测可溶性B7-H4的ELISA夹心法.方法:采用抗人B7-H4单克隆抗体(mAb)包被酶标板, 以兔抗鼠B7-H4多克隆抗体为夹心抗体、 HRP标记羊抗兔IgG为检测抗体、重组小鼠可溶性B7-H4为标准品, 建立检测可溶性B7-H4的间接ELISA法, 并对50例正常人和37例术后乳腺癌患者血清样本进行了检测.结果:建立的夹心ELISA法检测B7-H4的线性范围为3.13 μg/L～200 μg/L, 批内、 批间变异系数分别为7.92%和11.1%.50例正常人和37例术后乳腺癌患者血清B7-H4的含量分别为(31.62±9.85) μg/L和(42.52±16.63) μg/L, 两者比较差异有统计学意义(P<0.001).结论:成功建立了一种灵敏度高、 稳定性好的检测可溶性B7-H4的夹心ELISA法.