目的 探讨99mTc-联肼尼克酰胺(HYNIC)-膜联蛋白V(Annexin V)活体检测细胞凋亡的可行性.方法 99mTc通过HYNIC标记Annexin V合成99mTc-HYNIC-Annexin V.建立兔VX-2肝癌模型.将10只新西兰大白兔随机分为2组,通过治疗剂量的化疗药物紫杉醇(PAC,n=6),同时建立对照组(C,n=4),分别予化疗前,化疗后24、48 h静脉注射99mTc-HYNIC-Annexin V,通过单光子发射计算体层摄影(SPECT)成像,选取肿瘤部位放射性计数(T)及腿部非肿瘤区部位放射性计数(NT),计算其比值(T/NT),进行半定量分析.最后1次显像后处死兔,取肿瘤组织,分别予免疫组织化学原位末端转移酶标记(TUNEL)和流式细胞仪(FCM)分析组织细胞凋亡率,并与核医学检测结果比较,确定核医学检测结果与其是否相关.实验数据以SPSS 17.0软件进行t检验、方差和相关分析.结果 99mTc-HYNIC-Annexin V标记率为95％以上,放化纯为95％以上.99mTc-HYNIC-Annexin V放射显像显示两组化疗前肿瘤部位放射性核素聚集T/NT为2.62±0.56、2.53±0.60.化疗后24h及48 h对照组放射性核素聚集T/NT分别为2.72 ±0.70、2.62±0.66,紫杉醇干预组放射性核素聚集T/NT分别为6.43 ±0.97、6.64±1.15,与对照组、化疗前比较差异有统计学意义(P＜0.01),24h与48 h两组间放射性核素显像差异无统计学意义(P＞0.05)；对照组与紫杉醇组免疫组织化学分析肿瘤组织细胞TUNEL染色阳性率分别为4.00±0.81、13.50±2.74,流式细胞分析肿瘤组织细胞凋亡率分别为(7.83±1.11)％、(20.81±3.33)％.两组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01),放射性核素聚集程度与免疫组织化学分析组织细胞TUNEL阳性率和流式细胞分析组织细胞凋亡率的结果显著相关(rTUNEL=0.747,P＜0.05；rFCM=0.909,P＜0.01).结论 紫杉醇可以诱导兔VX-2肝癌细胞凋亡,99mTc-HYNIC-Annexin V核素显像检测能够反映活体组织细胞凋亡,该方法能够在活体状态下检测细胞凋亡,化疗后24 ～48 h是放射性检测细胞凋亡的窗口时间。
99m Tc-联肼尼克酰胺-膜联蛋白V活体检测兔肝癌细胞凋亡的研究
【摘 要】
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目的 探讨99mTc-联肼尼克酰胺(HYNIC)-膜联蛋白V(Annexin V)活体检测细胞凋亡的可行性.方法 99mTc通过HYNIC标记Annexin V合成99mTc-HYNIC-Annexin V.建立兔VX-2肝癌模型.将10只新西兰大白兔随机分为2组,通过治疗剂量的化疗药物紫杉醇(PAC,n=6),同时建立对照组(C,n=4),分别予化疗前,化疗后24、48 h静脉注射99mTc-H
【机 构】
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210006南京医科大学附属南京医院普外科,210006南京医科大学附属南京医院普外科,华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心,华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心,210006南京
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2013年30期
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