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利用正交试验设计法L9（35），从引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度、Mg2＋浓度和dNTP浓度4种因素3个水平，对葛资源ISSR—PCR反应体系进行优化分析，并在此基础上对PCR反应的退火温度进行梯度筛选。结果表明，25μL最佳的葛资源ISSR-PCR反应体系是：1xPCRbuffer、0．20mmol／LdNTP、0．4μmol／L引物、2．5mmol／LMg2＋和0．5UTaqDNA聚合酶，引物UBC809的最佳退火温度为57．9℃。