【摘 要】
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目的探讨超声联合聚乙烯亚胺(PEI)在促进肝癌细胞(HepG2)的基因转染中有无协同作用。方法选用工业用和实验用PEI为研究对象。用锥虫蓝拒染法检测细胞成活率,选取合适的PEI浓
【机 构】
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武汉市华中科技大学同济医学院附属同济医院超声影像科
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目的探讨超声联合聚乙烯亚胺(PEI)在促进肝癌细胞(HepG2)的基因转染中有无协同作用。方法选用工业用和实验用PEI为研究对象。用锥虫蓝拒染法检测细胞成活率,选取合适的PEI浓度与绿色荧光蛋白基因(EGFP)质粒DNA共孵育,制备阳离子复合物(PEI/DNA)导入HepG2细胞中和/或辐照超声。24h后荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,流式细胞仪定量分析转染率。结果超声可促进质粒DNA在HepG2细胞的基因转染。PEI对细胞有毒性,当PEI浓度为0.001%时细胞成活率约为70%,选此浓度用于基因转染实验。2种PEI复合物均能显著促进质粒DNA基因转染,其转染率高于单纯辐照超声介导的基因转染,差异有统计学意义(P<0.01),2种PEI的转染率工业用组(15.42±4.71)%、实验用组(12.27±3.58)%之间的差异无统计学意义(P>0.05),加入PEI联合辐照超声后转染率下降(P<0.01)。结论 PEI和超声均能促进HepG2细胞基因转染,但PEI联合辐照超声后转染率明显下降,二者没有协同作用。工业用与实验用PEI一样具有促进基因转染的作用。
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