表皮生长因子受体特异性单链抗体的筛选及初步鉴定

来源 :广东药学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wcl929156

【摘要】

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目的从大型人源抗体库Griffin 1中直接筛选出靶向EGFR的单链抗体。方法以稳定转染的CHO—EGFR—GFP1细胞和未转染的CHO-K1细胞分别作为EGFR阳性和阴性细胞，采用负筛选的方法进

【作者】

：

赵晓蓉戴文涛王敏彭吉林黄韬王国斌伍钢沈关心

【机构】

：

广东药学院公共卫生学院,华中科技大学同济医学院

【出处】

：

广东药学院学报

【发表日期】

：

2007年2期

【关键词】

：

表皮生长因子受体抗体库单链抗体肿瘤靶向 EGFR antibody library scFv tumor targeting

【基金项目】

：

湖北省十一五重大科技攻关项目（2006AA301A05）

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目的从大型人源抗体库Griffin 1中直接筛选出靶向EGFR的单链抗体。方法以稳定转染的CHO—EGFR—GFP1细胞和未转染的CHO-K1细胞分别作为EGFR阳性和阴性细胞，采用负筛选的方法进行筛选；通过比较每轮投入及洗脱出噬菌体的效价比以及细胞ELISA检测多克隆p-scFv与阳性、阴性细胞结合情况对筛选过程进行监测；采用菌落PCR挑选含有全长scFv片断的菌落，进一步用细胞ELISA检测单克隆p-scFv与EGFR阳性及阴性细胞结合特异性；挑选EGFR特异性单克隆p-scFv采用DNA测序法确定克

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