目的 观察9％过氧化氢及相应的过氧化氢发生器对生物安全三级实验室的空间表面消毒灭菌效果,同时探讨生物安全柜,房间排风高效过滤器原位消毒的最佳灭菌方案.方法 同时采用枯草芽孢杆菌和嗜热脂肪芽孢杆菌作为生物指示剂(1×106 CFU/片),使用9％浓度的过氧化氢对生物安全三级实验室的空间表面和实验室的关键防护设备(生物安全柜和高效过滤器)进行不同时间(1.5、3.5、5h)的消毒效果验证,确定最有效的消毒方法.结果 保持室温20～25℃,相对湿度小于55％,使用9％过氧化氢,1.5 h消毒方法可以将房间空间表面的枯草芽孢杆菌和嗜热脂肪芽孢载体完全杀灭,但是无法将生物安全柜高效过滤器和房间的排风高效过滤器的枯草芽孢杆菌和嗜热脂肪芽孢载体完全杀灭;使用9％过氧化氢,3.5、5h消毒方法可以将房间空间表面,生物安全柜和房间的排风高效过滤器的芽孢杆菌载体完全杀灭.结论 9％过氧化氢和配套的CLEANCube过氧化氢发生器可用于生物安全三级实验室的终末消毒,经过多次消毒验证,最佳条件为:9％过氧化氢,3.5 h.