【摘 要】
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以传染性支气管炎病毒(IBV)标准毒株M41为材料,根据Genbank公开序列自行合成一对特异引物,用于扩增IBV的完整S1基因.建立了针对IBV基因组RNA特点的RT-PCR方法.对反应体系中的
【机 构】
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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095;新疆畜牧兽医总站,乌鲁木齐,830000
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以传染性支气管炎病毒(IBV)标准毒株M41为材料,根据Genbank公开序列自行合成一对特异引物,用于扩增IBV的完整S1基因.建立了针对IBV基因组RNA特点的RT-PCR方法.对反应体系中的重要反应物Mg2+、dNTP和引物浓度进行优化,确定其浓度值分别为1.5 mmol/L,200 μmol/L和40 μmol/L.使用此反应体系对国内IBV地方分离毒株JS/95/03,SD/97/01等10多个毒株的S1基因进行扩增,均扩增出预期1.7 kb的完整S1基因,说明此方法对于IBV的S1基因扩增具有一定的通用性.
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