【摘 要】
：
为了对羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)安徽株116基因进行生物信息学分析及原核表达.以ORFVAH-F10株为模板PCR扩增116基因,使用生物信息学软件预测该基因编码蛋白的结构与功能.同
【机 构】
：
安徽农业大学动物科技学院,合肥230036;淮北市畜牧中心,淮北235000
论文部分内容阅读
为了对羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)安徽株116基因进行生物信息学分析及原核表达.以ORFVAH-F10株为模板PCR扩增116基因,使用生物信息学软件预测该基因编码蛋白的结构与功能.同时将扩增产物克隆至pET-32a(+)原核表达载体,经BamHI及EcoR I双酶切鉴定后进行测序,构建pET-32a(+)-116重组质粒.转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)进行IPTG诱导,纯化蛋白后免疫BALB/c雌性小鼠制备多克隆抗体.测序结果显示,ORFV116基因全长561 bp,编码186个氨基酸.生物信息学分析结果显示:该蛋白分子量约为20.33 kDa,为不稳定亲水性蛋白;无信号肽、保守结构域及跨膜结构域;含有2个N糖基化位点和42个磷酸化位点;二级结构以无规则卷曲为主,分别为延伸链(5.91％)、α-螺旋(14.52％)与无规则卷曲(79.57％);预测该蛋白含有20个可能的B细胞优势抗原表位与4个CTL细胞表位.SDS-PAGE及Western-blot结果显示,ORFV116蛋白大小约为51 kDa,主要以可溶形式表达且具有良好的反应原性.
其他文献
为寻找到快速有效区分不同等级五粮浓香原酒的方法,以4种不同等级五粮浓香原酒为研究对象,采用顶空固相微萃取法、液液微萃取法与气相色谱-质谱联用技术对其香气成分进行研究
以马泡籽为原料,利用美拉德反应,通过油料的高温焙炒、还原糖与氨基酸之间的羰氨反应来制备具有独特香味的浓香型马泡籽油,以综合利用马泡瓜资源.对所制备的浓香马泡籽油进行
为探究蛇类肠道功能建立过程,采用形态测量和苏木精-伊红染色法,测定了出壳后3、7～10、20、30、40和50 d滑鼠蛇(Ptyas mucosus)肠道大小及组织学参数的变化.结果显示:(1)小肠
吴江为著名的丝绸之乡,丝绸行业发祥于明代,数百年来久盛不衰。邑内许多市镇的兴起都与丝绸密切相关。国内外史学界、经济学界、社会学界在研究资本主义萌芽,古近代手工业史
一、控温控湿贮藏法采用此法,关键是在一定温度范围内掌握好室内湿度。先是控温,辣椒生长要求的平均温度为25℃,入贮时最低温度为8℃,一般应将室温控制在8～10℃。再是控好贮
水体富营养化已成为当今世界广泛存在的水环境问题.杂食性鱼类分布广、食性杂,对水生态系统影响深远,可能会加重水体富营养化.以鲫(Carassius auratus)为对象,于室外构建了以