【摘 要】
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目的:探讨松果菊苷(echinacoside,ECH)对博来霉素(bleomycin,BLM)诱导的肺上皮细胞损伤、炎症反应及核因子E2相关因子2(Nrf-2)、核因子κB(NF-κB)p65和环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达的影响.方法:分别以1、2.5、5和10 mg/L的BLM及5、25、125和625 mg/L的ECH处理体外培养的人Ⅱ型肺泡上皮细胞系HEPApiC以探索BLM和ECH的最佳实验浓度.根据筛选的BLM和ECH的最佳实验浓度,将HEPApiC细胞分为对照组、BLM组和BLM+ECH
【机 构】
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南阳市中心医院呼吸与危重症医学科二病区,河南南阳473000
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目的:探讨松果菊苷(echinacoside,ECH)对博来霉素(bleomycin,BLM)诱导的肺上皮细胞损伤、炎症反应及核因子E2相关因子2(Nrf-2)、核因子κB(NF-κB)p65和环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达的影响.方法:分别以1、2.5、5和10 mg/L的BLM及5、25、125和625 mg/L的ECH处理体外培养的人Ⅱ型肺泡上皮细胞系HEPApiC以探索BLM和ECH的最佳实验浓度.根据筛选的BLM和ECH的最佳实验浓度,将HEPApiC细胞分为对照组、BLM组和BLM+ECH组,每组均进行3次独立实验.CCK-8法检测细胞活力;Hoechst 33258染色法和流式细胞术检测细胞凋亡情况;ELISA法检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β的水平;试剂盒法测定丙二醛(MDA)、活性氧簇(ROS)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平;Western blot法检测Nrf-2、NF-κB p65和COX-2的蛋白表达水平.结果:BLM和ECH的最佳实验浓度分别为10 mg/L和125 mg/L.与对照组比较,BLM组细胞活力、SOD活性及细胞质Nrf-2和细胞质NF-κB p65的水平均显著降低(P<0.05,P<0.01),而细胞凋亡水平、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA及COX-2、细胞核Nrf-2和细胞核NF-κB p65的水平均显著增加(P<0.01);与BLM组比较,BLM+ECH组细胞活力、SOD活性及细胞核Nrf-2和细胞质NF-κB p65水平均显著增加(P<0.01),而细胞凋亡水平、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA及COX-2、细胞质Nrf-2和细胞核NF-κB p65的水平均显著降低(P<0.05,P<0.01).结论:在BLM处理的HEPApiC细胞中,ECH能抑制氧化应激损伤和炎症反应,且可减少NF-κB核转位和降低COX-2蛋白表达,并增加Nrf-2核转位.
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