紫草素对人角质形成细胞HaCaT增殖抑制以及细胞毒性的初步研究

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目的研究紫草素对人角质形成细胞HaCaT细胞增殖的抑制作用,以及对细胞凋亡的影响,并对其细胞毒作用进行初步研究。方法以不同浓度的紫草素处理HaCaT细胞,MTT法检测紫草素对HaCaT细胞增殖抑制作用,并计算其IC50;流式细胞仪检测紫草素对HaCaT细胞凋亡的作用,Western blotting检测其对Caspase-3以及Bcl-2蛋白的影响;Griess法检测细胞上清中一氧化氮(NO)释放量、同时检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)释放量。结果紫草素可明显抑制HaCaT细胞增殖,24h和48h其半数致死量分别为1.43μg/ml和0.80μg/ml;紫草素可明显促进HaCaT细胞凋亡,且剂量越大,凋亡率越明显,紫草素促进角质形成细胞凋亡作用与诱导Caspase-3以及抑制Bcl-2蛋白表达有关。紫草素直接作用于HaCaT细胞后,细胞培养上清中NO和LDH释放量明显增加。结论紫草素直接抑制人角质形成细胞增殖,诱导凋亡,但也具有一定的细胞毒作用。
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