【摘 要】
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构建了一个含有CP4-EPSPS外源基因的细菌表达载体并在大肠杆菌Transtta菌株中的高效表达,通过SDS-PAGE检测发现,目标蛋白完全以可溶性方式存在于细胞破碎上清液中,且约占到细
【基金项目】
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“十一五”国家科技支撑计划项目（2008BAK41B02-3,2006BAD31B01-04）, 国家转基因生物新品种培育重大专项[2008ZX08005-004（3-6）,2009ZX08005-004B], 中国农业科学院生物技术研究所中央级公益性科研院所基本科研业务专项资助
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构建了一个含有CP4-EPSPS外源基因的细菌表达载体并在大肠杆菌Transtta菌株中的高效表达,通过SDS-PAGE检测发现,目标蛋白完全以可溶性方式存在于细胞破碎上清液中,且约占到细菌可溶性蛋白的40%左右。收集该上清液并进而通过连续2次镍柱亲和层析,CP4-EPSPS重组蛋白纯度可达99.9%以上,对其进行N端序列分析,与预期的结果完全一致。以其作为标准品,通过ELISA,成功检测出三株CP4-EPSPS转基因烟草中目标蛋白含量分别为0.292μg/g、0.477μg/g和0.703μg/g。该蛋
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