应用real-timePCR测定幼兔肠道内双歧杆菌和乳杆菌的变化

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目的:通过研究PN过程中肠道双歧杆菌和乳杆菌的变化,探讨PN导致肠屏障功能障碍的机制.方法:将新西兰种白兔16R,分成对照组(正常兔食饲养)和PN组(幼兔完全肠外营养).10d后自直肠取出新鲜粪便,抽提所有细菌DNA,常规PCR检测合成的双歧杆菌和乳杆菌属引物的特异性.应用青春双歧杆菌和植物乳杆菌作外标准品,梯度稀释制作标准曲线,作灵敏度测定.应用SYBRGreenIReal-timePCR法,定量检测粪便中双歧杆菌和乳杆菌含量.结果:琼脂糖凝胶电泳显示两种引物特异性良好,灵敏度达到10^2个菌.溶解曲线
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