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研究FasL基因转染鼠骨髓单个核细胞(BMMNC)后,诱导同种异体反应性T淋巴细胞凋亡的效率。
方法采用脂质体法将mFasL-cDNA转入Balb/C小鼠造血细胞,Western-Blot检测其是否表达,然后将转染mFasL-cDNA的BMMNC与BAC鼠(Balb/C×C57BL/6,H-2d×b,F1)脾单核细胞(SMNC)混合培养,通过混合淋巴细胞反应(MLR)及流式细胞仪(FCM)检测SMNC的凋亡效率。
结果基因转移后Western-Blot分析Balb/C鼠BMNC显示明显抗FasL抗体识别的条带(约40 000),未转基因的BMMNC无阳性条带发现;转基因组进行MLR其每分钟脉冲数(CPM)值为5 628±186,明显低于对照组(9 674±78)(t=44.86, P<0.001);FCM检测转基因组诱导SMNC凋亡率为(14.8±0.4)%,明显高于对照组[(1.8±0.4)%](t=3.01,P<0.01)。
结论采用脂质体法能将mFasL-cDNA转入鼠BMMNC,并能有效表达,转基因后的BMMNC有诱导同种异基因反应性T淋巴细胞凋亡的作用。