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目的
观察中介体复合物亚基19(Med 19)基因沉默对人前列腺癌LNCaP细胞增殖、生长作用的影响,探讨其机制。
方法采用针对Med 19的小干扰RNA(siRNA)慢病毒载体转染LNCaP细胞,应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测Med 19-siRNA转染组(siRNA)与对照组(scRNA)Med 19基因和蛋白表达情况,噻唑蓝(MTT)实验、软琼脂实验评估肿瘤细胞增殖和生长能力,流式细胞仪分析细胞周期的变化。计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示。组间比较采用双侧t检验。
结果Med 19-siRNA慢病毒感染LNCaP细胞后,转染组Med 19 mRNA和蛋白表达与对照组比较明显降低,差异有统计学意义(t=-69.141,P<0.01);MTT实验表明转染组细胞增殖较对照组缓慢(t=-11.948,P<0.01);软琼脂实验中转染组集落数量为(8.61±0.51)个,较对照组[(18.89±0.82)个]显著减少,差异有统计学意义(t=-98.775,P<0.01);转染组G0/G1期细胞比例为(67.29±1.70)%,与对照组[(56.23±1.46)%]比较差异有统计学意义(t=-21.906,P<0.01)。
结论沉默Med 19基因后,促使人前列腺癌LNCaP细胞停留在G0/G1期增多,导致前列腺癌在增殖、生长能力均受到显著抑制。